应用双特异分子探针技术对圆海链藻（Thalassiosira rotula）进行定性定量检测研究 在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】
Detection and Quantification of Thalassiosira Rotula with Double Specific Probe Assay
【作者】
李秀芹 ;
【导师】
于志刚 ;
【学位授予单位】
中国海洋大学 ;
【学科专业名称】
海洋生物学
【学位年度】
2005
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
中国海洋大学
【网络出版投稿时间】
2005-10-26
【关键词】
浮游植物 ;
硅藻 ;
圆海链藻 ;
寡核苷酸探针 ;
双特异分子探针技术 ;
【英文关键词】
Phytoplankton ;
Thalassiosira rotula ;
Diatoms ;
Oligonucleotide probes ;
Double specific probe assay ;
【中文摘要】
对海洋浮游植物进行分离、纯化、种类鉴定和定性定量检测是浮游植物研究中最重要的工作之一。对于浮游植物的检测与鉴定,传统的研究方法为形态学观察,随着现代科技的发展,一些先进的技术已经应用到浮游植物检测中,比如核酸杂交技术、分子免疫技术、实时荧光定量PCR及流式细胞术,另外HPLC技术也应用到浮游植物检测中来。目前利用分子生物学技术已经可以直接对单个浮游植物细胞进行操作。当前研究的热点是应用核酸探针技术对浮游植物进行定性定量分析,特别是原位杂交和三明治杂交在浮游植物检测中应用比较广泛。
本研究对圆海链藻进行了DNA的提取与纯化、rDNA序列扩增、克隆与测序;并基于一种全新的浮游植物检测技术——双特异分子探针技术,设计出一套分子探针;通过对各探针的使用浓度、探针标记方法的选择、酶切温度对特异性的影响以及样品与处理方式对检测信号的影响等实验条件的探讨与优化,建立了圆海链藻的稳定可靠的定性定量检测方法;通过核酸酶降解实验验证了该技术中与寡核苷酸探针进行杂交的靶物质主要是RNA;并进行了该方法的探针特异性实验、标准曲线的建立以及模拟样品的检测;另外对藻细胞保存方式对检测信号的影响以及整个细胞生长...
【英文摘要】
To purify, identify, detect, and quantify phytoplankton is the main work of the study of phytoplankton. Morphologic analysis is the traditional method to study phytoplankton, and with the rapid development of science and technology, many modern technologies are introduced into this field, such as nucleic acid hybridization assay, molecular immunoassay, real time PCR, flow cytometry and HPLC et al. One cell can be detected by molecular technique now. Using nucleic acid probe assay, especially fluorescence in...
【更新日期】
2005-12-16
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