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头孢噻呋单克隆抗体的制备及其ELISA、HPLC检测方法的初步研究  
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【英文题名】 Preparation and Characterization of Monoclonal Antibodies Again Ceftiofur and the Develeopment of ELISA and HPLC
【作者】 郝志慧;
【导师】 刘力; 陈杖榴;
【学位授予单位】 西南农业大学;
【学科专业名称】 临床兽医学
【学位年度】 2005
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 西南农业大学
【网络出版投稿时间】 2005-07-19
【关键词】 头孢噻呋; 单克隆抗体; ELISA:HPLC; 残留检测;
【英文关键词】 Ceftiofur; monoclonal antibody; ELISA; HPLC;
【中文摘要】 作为第一个动物专用的头孢菌素类抗生素-头孢噻呋(ceftiofur),由于其在兽医临床上的日益广泛使用,其在动物性食品中的残留已逐渐引起人们的高度关注。为了研制头孢噻呋残留快速检测试剂盒,我们制备了头孢噻呋的单克隆抗体,研究了其ELISA检测方法,为试剂盒的研制打下了基础。同时也对头孢噻呋残留检测方法中常用的高效液相检测方法作了初步探索。 本实验以人工合成的头孢噻呋免疫原免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备了5株能稳定分泌抗头孢噻呋单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对单抗进行纯化鉴定并初步建立了检测头孢噻呋的竞争ELISA方法。 首先,实验采用直接交联法、戊二醛法、碳二亚胺法、马来酰胺活化法等合成方式合成了头孢噻呋免疫原(KLH-SMCC-DESCEF、CEF-BSA)和包被原(BSA-S-GMBS-CEF、CEF-HSA)。抗原经紫外扫描分析法进行定性判定。结果表明:载体蛋白在交联半抗原的前后其吸收光谱发生了明显的改变;定性分析结果显示头孢噻呋人工抗原合成成功。小鼠免疫实验也证明了抗原的合成是成功的。 用合成的免疫原(KLH-S...
【英文摘要】 Ceftiofur is cephalosporin used on veterinarian's clinic at first, because it is used extensively day by day in veterinarian, its residue in animal food has already aroused great concern from people gradually. To development of ELISA kit for rapid screening the residues of Ceftiofur,we prepared the monoclonal antibodies against Ceftiofur and developed the ELISA method.and 5 hybridomas secreting antibodies against ceftiofur were selected and cloned.A Ci-Elisa method for detecting ceftiofur was established. W...
【更新日期】 2005-10-14

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