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农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化和转基因植株的检测  
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【英文题名】 Optimization of High-efficiency Agrobacterium-mediated BADH Gene Transformation System of Alfalfa and Detection of Transgenic Plants
【作者】 王国良;
【导师】 李阳春; 夏阳; 梁慧敏;
【学位授予单位】 甘肃农业大学;
【学科专业名称】 草业科学
【学位年度】 2004
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 甘肃农业大学
【网络出版投稿时间】 2005-01-26
【关键词】 紫花苜蓿; 农杆菌介导的遗传体系的优化; BADH基因; PCR-Southern检测; 转基因植株; 抗盐浓度试验;
【英文关键词】 alfalfa; agrobacterium-mediated genetic transformation; BADH gene; transgenic plants; PCR-Southern; salt tolerance;
【中文摘要】 土壤盐渍化是一个世界性问题,是影响农业生产和生态环境的一个非常重要的非生物胁迫因素。如何利用大面积的盐碱地,提高作物耐盐性是生物科学的一个重要研究课题。苜蓿是一种被誉为“牧草之王”的多年生优质豆科牧草,它不仅营养价值高,适口性好,适应性强、抗寒耐旱,是全世界广为种植的优良牧草,而且对生态环境治理、固土护坡、防止水土流失起到非常重要的作用。如何进一步提高其耐盐抗旱特性,扩大其种植范围,是当前苜蓿生产面临的重要研究课题,基因工程的发展和应用为苜蓿抗盐育种开辟了一条新的途径。本实验是苜蓿抗盐碱育种研究课题的一部分,是在已建立的苜蓿高频组培再生体系的基础上,进行了农杆菌介导的甜菜碱醛脱氢酶基因转化的进一步研究。主要结果如下: 1. 优化了农杆菌介导的苜蓿高效遗传转化体系。本试验在已有工作的基础上,对转化体系各因子进行了优化,确定了Cef最适浓度为400mg/L,Kan最适浓度为50mg/L;以GUS阳性发生率和抗性愈伤组织率为转化指标探讨了不同苜蓿基因型、不同外植体类型和外植体的不同生理状态对转化效率的影响,并选取转化效率高的基因型作为主要受体,侵染15天左右的叶片;在其它因子条件的优化中,适宜的...
【英文摘要】 Saline soil is a very important nonbiological force factor influence agricultural production and ecological environment. How to use the great area saline soil and improve the tolerance of salt is an important research subject in bioscience. The alfalfa is a kind of perennial high-quality legume family herb that is praised as “king of herb”. It has agreeable taste and costly nutrition, and has a good adaptability. It is able to bear the drought and resist cold, and has a good ecological benefit to ecological...

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