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中性蛋白酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达  
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【英文题名】 Cloning and Overexpression of Gene Encoding the Neutral Protease from B.subtilis in Pichia Pastoris
【作者】 许波;
【导师】 黄遵锡;
【学位授予单位】 云南师范大学;
【学科专业名称】 环境科学
【学位年度】 2004
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 云南师范大学
【网络出版投稿时间】 2004-10-19
【关键词】 中性蛋白酶; 枯草芽抱杆菌; 基因克隆和表达; 毕赤酵母; 发酵条件优化; 酶学性质及应用特性;
【英文关键词】 neutral protease; Bacillus subtilis; gene cloning and expression; Pichia pastoris; optimization of fermentation conditions; enzyme properties and application properties;
【中文摘要】 中性蛋白酶是指其最适作用pH介于6.0~7.5之间的一类蛋白酶,能催化蛋白质肽键水解。由于具有催化反应速度快,无工业污染,催化反应条件适应性宽等独特的性质和优点,被广泛地应用于食品、制药、化妆品、洗涤剂、丝纺、毛皮软化等行业。为了大幅度提高中性蛋白酶发酵单位以降低生产成本,本论文以陆良酶制剂厂的中性蛋白酶生产菌株枯草芽孢杆菌(B.subtilis)为研究对象,克隆并在毕赤酵母中表达了其包括pro-序列在内的中性蛋白酶全长基因以及功能区基因。同时,通过对重组毕赤酵母发酵条件的优化,以及重组中性蛋白酶粗酶酶学和应用特性的研究,为中性蛋白酶的蛋白质工程提供理论基础,并为该酶的高效表达和以后的应用奠定基础。 本论文的主要内容有四个部分: 1.枯草芽孢杆菌包括前导序列(pro-序列)在内的中性蛋白酶全长基因和功能区基因片段的克隆; 2.中性蛋白酶全长基因和功能区基因片段在毕赤酵母中的表达; 3.重组毕赤酵母发酵条件的优化; 4.重组中性蛋白酶粗酶的酶学和应用性质研究。 ...
【英文摘要】 The neutral protease (NPR) is a protease which suitable pH is 6.0~7.5. It can catalyze the cleavage of peptide bonds in proteins. Since the neutral proteases have many features and advantages in industry such as high speed and wide range of conditions of catalyzed reaction without pollution, they have been extensively used in leather treatment, detergent, food and pharmaceutical industry. To improve production of the neutral protease and to understand the function of the pro sequence , both the ac...

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导师:黄遵锡    导师单位:云南师范大学    学位授予单位:云南师范大学
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