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旋毛虫分子分类和49ku结构基因在昆虫细胞中表达研究  
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【英文题名】 The Studies on Trichinella Spp.of Molecular Taxonomy and Expression of 49ku Structural Protein Gene for Insect Cells
【作者】 李冬梅;
【导师】 宋铭忻;
【学位授予单位】 东北农业大学;
【学科专业名称】 预防兽医学
【学位年度】 2004
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 东北农业大学
【网络出版投稿时间】 2004-09-06
【关键词】 旋毛虫; 18S; rRNA基因; 49ku; ES结构基因; 序列分析; 杆状病毒表达;
【英文关键词】 Trichinella spiralis; 18S rRNA; 49ku ES structural gene; sequences analysis; baculovirus express;
【中文摘要】 18S rRNA基因是一类编码核糖体小亚基RNA、长约1800bp的DNA序列，由于在生物体内含量较大占80%左右，且在进化过程中非常保守，核苷酸的替换率较低，因而它是探讨生物高级分类群系统演化的难得工具之一。本实验克隆并比较了旋毛虫5个隔离种的18S rRNA基因序列，分析他们的同源性，为旋毛虫的分类和诊断开辟了新的途径。旋毛虫排泄分泌（Excretory-Secretory antigen，ES）抗原，即旋毛虫生长过程中的排泄分泌产物，是旋毛虫检测和免疫的良好抗原。本实验将本地毛形线虫（Trichinella nativa）ES抗原的49ku结构基因构建到杆状病毒表达载体上，并在昆虫细胞中得到表达。 本实验以NCBI中U60231序列为参考，设计并合成引物，用改进AGPC方法结合Trizol LS试剂盒提取旋毛虫总RNA，用分光光度计检测RNA的质量。然后用特异性引物, 对旋毛虫标准隔离种旋毛形线虫（Trichinella spiralis）和本地毛形线虫，以及分离自黑龙江省的猪旋毛虫、犬旋毛虫和猫旋毛虫5个旋毛虫隔离种进行RT-PCR扩增目的基因18S rRNA片段，均扩增出1800...
【英文摘要】 18S rRNA gene, encoded small subunit ribosomal RNA and 1800bp, was 80% in organism and regarded as highly conserved molecules in course of evolution, so 18S rRNA gene was the important marker for organism taxonomy and system evolution. In this study, we cloned and analyzed 18S rRNA gene sequences of five Trichinella isolates. The result is meaningful in identifying and classifying the different Trichinella isolates. The ES protein of Trichinella was the Excretory-Secretory (ES) products of the alive worms. ...

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导师：宋铭忻    导师单位：东北农业大学    学位授予单位：东北农业大学
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