脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）人工抗原的合成及其酶联免疫检测方法的建立-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）人工抗原的合成及其酶联免疫检测方法的建立

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【英文题名】	The Artificial Antigen Synthesis and Detection of Deoxynivalenol Using Indirect Competitive ELISA
【作者】	李华;
【导师】	王金生; 陈怀谷; 史建荣;
【学位授予单位】	南京农业大学;
【学科专业名称】	植物病理学
【学位年度】	2003
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	南京农业大学
【网络出版投稿时间】	2004-07-13
【关键词】	DON; 人工抗原; 抗体; ELISA; 小麦;
【英文关键词】	DON; artificial antigen; antibody; ELISA; wheat;
【中文摘要】	脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是镰刀菌产生的一种真菌毒素，广泛存在于世界各地的谷物，特别是小麦中。由于DON能引起动物及人的多种中毒反应，因此对食物中的DON进行快速检测显得非常重要和迫切。本论文对DON的快速检测进行了研究，包括DON的结构修饰、抗体制备和ELISA方法的建立，结果如下： 1、采用保护-去保护策略使DON的3位C上的羟基与琥珀酸酐反应，使DON衍生后获得一个羧基。利用薄层色谱法跟踪反应进程。采用制备薄层色谱法纯化Rf为0.53的反应产物(DON的Rf为0.66)，纯化产物利用高效液相色谱分析，最后采用电喷雾离子化质谱(ESI-MS)分析产物的分子量，其[M-H~+]为395.1，与3-HS-DON的分子量相同，因此确认衍生产物是3-HS-DON。采用碳化二亚胺法偶联3-HS-DON与载体蛋白BSA和OVA，偶联产物利用快速蛋白液相层析系统(FPLC)进行分析。 2、用3-HS-DON-BSA作免疫原，免疫Balb/c小鼠和豚鼠。经过间接ELISA法检测，豚鼠血清的效价为1：6400，小鼠混合血清的效价为1：12800。选取小鼠血清进行交叉...
【英文摘要】	Deoxynivalenol (DON) is produced by the Fusariwn spp. and is found worldwide in cereal grains. Because DON is a mycotoxin capable of causing disease in animals and human being, it is very important and imperative to detect DON in foodstuffs. This thesis studied the structure modification, antibody preparation and ELISA for DON. 1. The conversion of DON to 3-HS-DON was facilitated by protecting two of the three available hydroxyls with a cyclic boronate ester and making DON react with the C3 hydrox...

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