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海栖热袍菌和重组毕赤酵母发酵产极耐高温木聚糖酶及酶的化学修饰  
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【英文题名】 Production of Thermophilic Xylanase by Thermotoga Maritima and Recombinant Pichia Pastoris and Modification of Enzyme
【作者】 余小红;
【导师】 李里特;
【学位授予单位】 中国农业大学;
【学科专业名称】 农产品加工与贮藏工程
【学位年度】 2004
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 中国农业大学
【网络出版投稿时间】 2004-07-19
【关键词】 海栖热袍菌; 毕赤酵母; 极耐高温木聚糖酶; 高密度发酵; 活性中心;
【英文关键词】 Thermotoga maritima; Pichia pastoris; thermophilic xylanase B; high-density-fermentation active sites;
【中文摘要】 本论文研究了海栖热袍菌和含极耐高温木聚糖酶B的基因的重组毕赤酵母的的发酵条件的优化，并在通过较简单的分离纯化后，研究了极耐高温木聚糖酶B的化学修饰，得到的主要结论如下： 1．对海栖热袍菌(Thermotoga maritima)摇瓶产酶实验显示，玉米芯木聚糖是最好的碳源，酵母提取物要优于其他有机氮和无机氮，该菌株最适产酶pH是6.5，培养基的最适NaCl浓度为2.28％，添加表面活性剂作用较小。海栖热袍菌的最高产酶酶活为0.50U／mL。 2．对毕赤酵母摇瓶产酶实验显示，接种量初始OD_(600)=8是最合适的接菌时间，最适初始pH=5.0，1.5％甲醇浓度为最适诱导甲醇浓度，添加0.1％Triton114时产酶量可以增加到原来的2倍以上，接近海栖热袍菌酶活的10~4倍。在5L发酵罐上，甲醇流加速度为3mL／(h.L)，10天培养后，毕赤酵母的菌体量可以达到OD_(600)=260，实现了高密度发酵，极耐高温木聚糖酶酶活达到108U／mL，外源蛋白量为207mg／L。 3．经过SephadexG-...
【英文摘要】 In the paper, the culture condition of Thermotoga maritima and recombinant Pichi pastoris was considerated firstly, chemicial modification and active sites of thermophilic xylanase B was studied after purification of xylanase. The main content and result of the study were as following: 1. The effects of different factors on thermophilic xylanase production by Thermotoga maritima were studied in hungate tube. Corncob xylan and yeast extract were the best carbon and nitrogen resources, ...

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