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城市污水处理系统的菌群分析和nap基因的克隆表达  
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【英文题名】 Microflora Analyse in Active Sludge of Sewage Treatment and Clone and Express Nap Gene Cluster in Pseudomonas
【作者】 马展;
【导师】 张德纯;
【学位授予单位】 重庆医科大学;
【学科专业名称】 临床检验诊断学
【学位年度】 2003
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 重庆医科大学
【网络出版投稿时间】 2003-07-08
【关键词】 硝酸盐还原; 假单胞菌; 基因工程;
【英文关键词】 denitration; pseudomonas; recombinant DNA;
【中文摘要】 本课题对脱氮污水处理工艺的活性污泥的菌群组成进行了分析,以期获得适合于脱氮基因工程改良的出发菌;克隆napEFDABC基因簇并在出发菌中表达,观察其硝酸盐还原特性,为日后脱氮基因工程菌的构建奠定基础。 首先,采用平板稀释法对使用该工艺的活性污泥进行了菌落计数,并对分离到的菌落进行详细的生化鉴定,发现在采用该工艺的活性污泥中,优势菌为假单胞菌、肠杆菌、莫拉氏菌和不动杆菌,分别占总菌数的23%、16%、16%和12%。根据菌群分析的结果,对其中的优势菌——假单胞菌进行脱氮能力测定,并分析了其对常作为筛选标志的抗生素的药物敏感性,从中选择了两株耐药性弱、脱氮能力强的菌作为基因改良的出发菌。 然后,用PCR的方法从假单胞菌G179中扩增出一段4.7kb的片段,含有包括了调控、引导序列在内的整个napEFDABC基因簇全长,将该片段克隆于多寄主质粒pJM6a-lac多克隆位点的XbaI和SacI位点之间,构建出重组质粒pJM6a-nap,经酶切和PCR鉴定同预期相吻合。在土著启动子的作用下napEFDABC基因簇在出发菌中得到了表达,测定重组菌 ...
【英文摘要】 Objectives: To explicate the composition of microflora in active sludge of sewage treatment. To obtain proper strains fitting for genes manipulating to enhance the ability of denitrification. To clone napEFDABC gene cluster from Pseudomonas strain G179 and express it in the strains we had screened. Methods and Results: First of all, we counted the population of bacteria in the active sludge. Using their biochemical and growth properties identify those strains we had isolated. We not...

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导师:张德纯    导师单位:重庆医科大学临床微生物学教研室    学位授予单位:重庆医科大学
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