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促黄体素释放激素单克隆抗体的研制及去势疫苗相关动物实验  
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【英文题名】 The Preparation of Monoclonal Antibody Against Luteinizing Hormone Releasing Hormone and Animal Expriments of Emasculating Vaccine
【作者】 潘芹芹;
【导师】 吉传义;
【学位授予单位】 南京农业大学;
【学科专业名称】 预防兽医学
【学位年度】 2003
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 南京农业大学
【网络出版投稿时间】 2003-12-23
【关键词】 促黄体素释放激素; 单克隆抗体; RT-PCR; 可恢复性; 佐剂;
【英文关键词】 monoclonal antibody; Luteinizing Hormone Releasing Hormone; RT-PCR; recovery; adjuvants;
【中文摘要】 去势疫苗能刺激机体产生LHRH抗体,中和内源性LHRH,达到温和去势的目的。为了建立一种定量检测其抗原成分的方法并对其是否可逆进行验证,进行了本实验。应用Trx-LHRH融合蛋白与鼠源Trx抗体制备的复合物免疫BALB/C小鼠,当LHRH抗体达到1:10~4。取脾细胞与SP2/0用PEG-1500融合,采用间接ELISA和抑制ELISA筛选阳性克隆,多次有限稀释得到D4B7、B3E6两株单抗,制备腹水。用兔源Trx抗体和LHRH单抗建立双抗体夹心ELISA,定量检测去势疫苗抗原成分。 RT-PCR方法从SD大鼠下丘脑扩增LHRH基因,以β-Action作为检测LHRH mRNA稳定性的参照,比较不同发育阶段LHRH表达量的差异,发现出生后1-2日龄有LHRH基因表达,至青春期又重新启动LHRH表达,这一结果对于研究LHRH在发育期的调控提供了一定基础。 以去势疫苗免疫的性成熟前小鼠(断奶前、断奶后)和性成熟小鼠为动物模型,对性行为、受孕情况、睾丸肉眼及组织学变化、精子数量及活动能力、睾酮水平在免疫期和恢复期与正常组对比,发现去...
【英文摘要】 The BABL/C mice were immunized with the compound of Trx-LHRH and trx antibody. When the titre came to 1:104, the spleen cells were fused with the SP2/0 by PEG-1500. The hybridoma surprunt was detected with indirect ELISA and inhibitory ELISA. The hybridoma strains D4B7 and B6E6 secreting Mcab against LHRH were obtained by dilluting several times and the ascite was identified with Westen-blot. A double antibody sandwich ELISA was established to detect the quantity of effective content of the emas...

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导师:吉传义    导师单位:南京农业大学    学位授予单位:南京农业大学
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[6] 吴荣春.生长抑素基因工程活载体苗细胞生产工艺的建立及其检测技术[D]. 南京农业大学,2003

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