干旱诱导杨树cDNA文库的构建及DDRT-PCR制备筛选文库的探针的研究-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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干旱诱导杨树cDNA文库的构建及DDRT-PCR制备筛选文库的探针的研究

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【英文题名】	Studies on the Construction of cDNA Library in Drought-Induced Popμlus Simonii and Preparation of Library-Screening Probe with the mRNA Differential Display
【作者】	贾志平;
【导师】	韩素英; 齐力旺;
【学位授予单位】	山西农业大学;
【学科专业名称】	植物学
【学位年度】	2003
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	山西农业大学
【网络出版投稿时间】	2003-11-12
【关键词】	干旱诱导; 小叶杨; cDNA文库; 差异显示; 回收;
【英文关键词】	drought-induced; cDNA library; differential display; recovery; Popplus; simonii;
【中文摘要】	改善和提高植物的抗旱性研究是植物抗逆性研究的重要内容。随着分子生物学技术的发展，通过基因工程改良植物的抗旱能力被广大科研工作者认为是一种快捷，有效的方法。作为基因工程的上游技术-基因克隆在上世纪九十年代后得到迅速发展，本文对近年来植物基因克隆新技术，新方法进行简要的综述，重点对差异显示技术(DDRT-PCR)进行了阐述。本研究以小叶杨(Popμlus simonii)为实验材料，构建了干旱诱导小叶杨的cDNA文库。并通过差异显示技术获取筛选cDNA文库的探针，取得如下研究结果：用ZAP噬菌体为载体系统，建成了原始库容为2×10~5pfu／ml的干旱处理样品库和0.8×10~5pfu／ml的对照库。经文库扩增后，干旱处理样品库增加为2.0×10~(10)pfu／ml，对照库增加为1.2×10~8pfu／ml。通过银染法展示DDRT-PCR结果，干旱处理样和对照样共有近5000余条带显现，干旱处理样与对照样之间有较大差异，共挑取差异带35条。对差异带回收、二次扩增后直接测序，通过EST BLAST进行比对，找到与抗旱相关的cDNA片段。本研究还对聚丙烯酰胺凝胶电泳条带的回收做了一定的改良，...
【英文摘要】	It's an important branch of plant research on stress resistance to enhance or improve the capability of drought and water deficit-tolerance in plant.With the advance of molecular biological technique,bioengineering becomes a rapid efficient methond of improving plant resistance to drought,water deficit,on the viewpoint of many researchers.Gene cloning,as an upstream technique of bioengineering,was being developed after 1990s In this thesis,the author elaborated the situation,characteristics,the ...

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