自1985年G P Smith首次提出噬菌体展示技术以来,随着生物技术的发展,噬菌体随机肽库已成为研究分子间相互作用的有力工具,特别是在抗原表位研究方面。
猪瘟病毒E2蛋白是病毒的主要结构糖蛋白,能诱导猪产生中和性抗体,因而是主要的保护性抗原,因此研究E2蛋白具有重要的理论和实际意义。本室利用E2基因疫苗制备了多株单抗,为E2的抗原表位研究提供了条件,我们以噬菌体随机12肽库分析鉴定了猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位,为深入研究猪瘟病毒的抗原结构、制备更有效的诊断试剂和疫苗提供更多理论依据。
在本实验中,利用随机12肽库对抗猪瘟病毒(classical swine fever virus CSFV)糖蛋白mE2的单抗A11进行表位筛选,经过四轮筛选以后,随机挑取11个克隆作竞争-ELISA检测,结果表明,所挑11个克隆中,有9个克隆能对mE2蛋白和A11反应产生抑制作用,抑制率最高可达64%;DNA测序以后经过DNASTAR软件分析,发现它们的核心序列为ANWRALSL,该核心序列与猪瘟病毒E2蛋白的28-35位氨基酸TTWKEYS...
【英文摘要】
Phage display describes a selection technique in which a peptide or protein is expressed as a fussion with a coat protein of bacteriophage, resulting in display of the fused protein on the surface of the virion, while the DNA encoding the fussion resides within the virion. Phage display has been used to creat a physical linkage between avast library of random peptide sequences to the DNA encoding each sequence, allowing rapid identification of peptide ligands for a variety of target molecules (a...