苹果种质资源玻璃化法超低温保存技术及其遗传变异分析-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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苹果种质资源玻璃化法超低温保存技术及其遗传变异分析

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【英文题名】	Cryopreservation Technique of Apple Germplasm by Vitrification and Analysis of Genetic Variation
【作者】	刘云国;
【导师】	王晓云;
【学位授予单位】	山东农业大学;
【学科专业名称】	生物化学与分子生物学
【学位年度】	2002
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	山东农业大学
【网络出版投稿时间】	2002-07-26
【关键词】	苹果种质资源; 茎尖; 玻璃化法; 超低温保存; 遗传变异;
【英文关键词】	apple germplasm; shoot tip; vitrification; Cryopreservation; genetic variation;
【中文摘要】	植物材料在超低温保存过程中，其物质代谢、能量代谢及其它生命活动降至最低限。因而，超低温保存是长期和稳定保存植物种质的有效方法之一。玻璃化超低温保存技术具有操作简单、程序简化及保存效果好等优点，越来越成为超低温保存的主要方法。本试验以离体培养的苹果茎尖作为材料，对玻璃化方法冻存的主要步骤包括继代培养、低温锻炼、预培养、玻璃化冰冻保护剂脱水、冷冻保存、化冻洗涤及再培养进行了优化，筛选了合适的冰冻保护剂PVS3，得到了70％以上的茎尖成活率，并通过对再生苗形态、生化及分子水平的遗传稳定性检测，证明了该方法保存苹果种质资源的可行性。主要实验结果如下： 1．将在高浓度蔗糖溶液(1.5mol．L~(-1))和ABA(0.5mg·L~(-1))的逆境培养基上生长的苹果试管苗继代培养不同时间，分别置于0～7℃的低温下，锻炼0～6周，发现苹果试管苗茎尖(0.5mm)在逆境培养基上继代培养3个月以上，4～5℃低温下锻炼4周以上，经液氮冷冻之后，成活率较高(69％)。 2．对比不同浓度的蔗糖及蔗糖和甘露醇配合使用对成活率的影响发现，单独使用蔗糖时，...
【英文摘要】	The life activity of plant materials is minimized near to the zero in liquid nitrogen, so cryopreservation is a safe and cost-effective method for long-term preservation of plant materials at an ultra-low temperature in liquid nitrogen. Vitrification is a main cryopreservation method because of its simple operating and simplified procedure. In this study, main steps of vitrification cryopreservation consisting of sub-culture, cold hardening, preculture, frozen storage, thawing and recovery-mediu...

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导师：王晓云导师单位：山东农业大学学位授予单位：山东农业大学
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