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致断奶仔猪腹泻和水肿病大肠杆菌F18菌毛单克隆抗体的研究及其初步应用  
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【副题名】
Development and Potential Applicaton of Monoclonal Antibodies Against F18 pili of Escherichia coli from Swine with Postweaning Diarrhea and Edema Disease
【作者】 吴晓东;
【导师】 刘秀梵; 张如宽; 高崧;
【学位授予单位】 扬州大学;
【学科专业名称】 预防兽医学
【学位年度】 2001
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 扬州大学
【网络出版投稿时间】 2001-09-18
【关键词】 大肠杆菌; 断奶仔猪腹泻; 水肿病; F18菌毛; 单克隆抗体; 直接凝集试验; 间接免疫胶体金试验;
【英文关键词】 Escherichia coli; postweaning diarrhea; edema disease; Fl 8 pili monoclonal antibody; direct agglutination; indirect inununogold;
【中文摘要】 以表达F18ab菌毛参考菌株107/86（O139∶K12∶H1）为研究对象，找 出了F18ab菌毛表达的最佳条件，采用热洗脱法使菌毛脱落，经硫酸铵沉淀，透 析后进行蔗糖密度梯度离心收集相应的条带，经SDS-PAGE鉴定，获得了较纯 F18ab菌毛，其主要亚单位分子量约为15kD；将提纯的F18ab菌毛免疫BALB/C 小鼠，利用淋巴细胞杂交瘤技术，经三次融合，用自行建立的检测方法共筛选出4 株能稳定分泌针对F18ab菌毛的特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株4G8、4H10、4A2 和3A12，腹水单抗的直接凝集价最高可达1∶3200。直接凝集试验结果显示：4 株单抗只与表达了F18ab菌毛的参考株107/86发生凝集反应，而与表达了F18ac 菌毛参考菌株8199（O141ab∶H4）以及猪源产F4、F5、F6和F41粘附素菌株和 F18菌毛阴性菌株LC-2α、HB101、TG1及沙门氏...
【英文摘要】 Abstract: Fl8ab pili of the reference Escberichia coli(E.coli) strain 107/86 from swine with edema disease were purified by a modified procedure. After thermo-separating from the bacterial cells, the pili were concentrated by precipitation with arnmoniurn sulfate, dialyzed, and solubilized in buffer containing deoxycholate. The fraction containing the pili was purified further by ultra-centrifugation in a sucrose gradient. After ultra-centrifugation, the purified pili from strain 107...

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