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鸭肝炎病毒部分cDNA文库的构建及鸭IgG的特性  
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【英文题名】 The Construction of Duck Hepatitis Virus Partial cDNA Library and the Characteristics of Duck IgG
【作者】 杨宗照;
【导师】 张书霞; 杨奎;
【学位授予单位】 南京农业大学;
【学科专业名称】 基础兽医学
【学位年度】 2000
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 南京农业大学
【网络出版投稿时间】 2001-12-19
【关键词】 鸭肝炎病毒; cDNA文库; 免疫球蛋白;
【英文关键词】 duck hepatitis virus(DHV); cDNA library; duck IgG; physicochemical characteristics;
【中文摘要】 用蛋白酶K消化粗提的鸭肝炎病毒（DHV），酚-氯仿抽提后再与生物素化 Oligo（dT）杂交，通过共价结合有链霉亲和素的顺磁微珠捕获RNA-Oligo（dT） 杂合体，采用磁性分离技术，得到了高纯度的DHV RNA。经测定， OD_(260)/OD_(280)=2.2，琼脂糖凝胶电泳只有一条均一的核酸带，大小约为7—8kb。 用Oligo（dT）_(15)为引物，用禽反转录酶（AMV）反转录DHV RNA，合成了cDNA 用T4 DNA连接酶与接头连接，磷酸化后，与经EcoRⅠ酶切并去磷酸化的载 体pUC19连接成重组质粒，将重组质粒转化大肠杆菌DH5α，构建了DHV 部分cDNA文库，通过颜色筛选及小量质粒酶切的方法，共筛选到80个阳性 克隆，经酶切鉴定，插入片段大小为1—7kb。将部分阳性菌落的质粒测序， 并与小RNA病毒科的其它成员作序列比较，结果显示，鸭肝炎病毒与泰勒鼠 ...
【英文摘要】 After duck hepatitis virus(DHV) was digested by proteinase Kits RNA was extracted by phenol-chloroform and purified by Qligo(dT) magnet bead Its molecular weight was about 7-8kb according to electrophoresis . cDNA of DHV RNA was synthesized using Oligo(dT)15 primer and avian myeloblastosis virus(AMV) reverse transcriptase. After it was linked with EcoR I adaptor,and cloned into the EcoR I site of pUC 19. With...

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