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工程菌产酶制备GABA测定条件的优化  
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【英文篇名】 Optimization the determination conditions of γ-aminobutyric acid producting by recombinant E.coli glutamate decarboxylase
【下载频次】 ★★☆
【作者】 张珂; 薛正莲;
【英文作者】 ZHANG Ke; XUE Zheng-lian (Coll.of Bioch.Engn.; Anhui Polytechnic University; Wuhu 241000; China);
【作者单位】 安徽工程大学生物与化学工程学院;
【文献出处】 安徽工程大学学报 , Journal of Anhui Polytechnic University, 编辑部邮箱 2012年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 γ-氨基丁酸; 谷氨酸脱羧酶; 大肠杆菌工程菌; 比色法;
【英文关键词】 γ-aminobutyric acid(GABA); Glutamate decarboxylase(GAD); recombinant E.coli; colorimetry;
【摘要】 基于Berthelot显色反应,采用正交设计法优化了测定大肠杆菌工程菌谷氨酸脱羧酶转化L-谷氨酸生成γ-氨基丁酸含量的条件.实验确定的最佳测定条件为:2.0mL 0.2mol/L pH6.0的醋酸缓冲液(内含0.1mmol/L的PLP,0.2mol/L的L-谷氨酸,稀释70倍),再依次加0.2mmol/L的硼酸缓冲液(pH9.0)1.0mL,0.5mL 6.0%重蒸苯酚和5.0mL 10%次氯酸钠,沸水浴加热10min后,迅速冰浴20min,待溶液出现蓝绿色后,加入60%(v/v)乙醇溶液4.0mL在640nm测定吸光值,绘制出标准曲线来计算GABA的含量.结果表明,该方法简便实用,相对误差小,适合实验室样品的快速检测.
【英文摘要】 Based on the Berthelot color reaction,the orthogonal method was used to determinate the content of γ-aminobutyric acid produced form recombinant E.coli Glutamate decarboxylase transformation of L-Glutamate.The optimum conditions were determined as follows:2.0 mL 0.2 mol/L pH 6.0 acetate buffer(containing 0.1 mmol/L of PLP,0.2 mol/L of L-Glutamate,diluted 70 times),incremented by 0.2 mmol/L of borate buffer(pH 9.0) 1.0 mL,0.5 mL 6.0% distilled phenol and 5.0 mL 10% sodium hypochlorite,boiling water bath heat...
【更新日期】 2012-05-24
【分类号】 TQ925
【正文快照】 γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)又名氨酪酸,是一种非蛋白质氨基酸[1],由谷氨酸(Glutamic acid,Glu)经谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,EC4.1.1.15,简称GAD或GDC)催化而来,是哺乳动物中枢神经系统中的重要的抑制性神经递质.γ-氨基丁酸作为脑内重要的神经递质,对

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