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博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达及纯化  
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【英文篇名】 Prokaryotic Expression and Purification of Borna Disease Virus Phosphoprotein
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【作者】 金戈; 张亮; 徐晓艳; 黄荣忠; 马丽华; 邓婧; 李文娟; 房亮; 谢鹏;
【英文作者】 JIN Ge; ZHANG Liang; XU Xiao-yan; HUANG Rong-zhong; MA Li-hua; DENG Jing; LI Wen-juan; FANG Liang; XIE Peng(Department of Neurology; The First Affiliated Hospital; Chongqing Medical University; Chongqing 400016; China);
【作者单位】 重庆医科大学附属第一医院神经内科; 重庆医科大学神经科学研究中心; 重庆市神经生物学重点实验室;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2011年 10期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 博尔纳病病毒; 磷蛋白类; 原核细胞; 基因表达; 纯化;
【英文关键词】 Borna disease virus(BDV); Phosphoproteins; Prokaryotic cells; Gene expression; Purification;
【摘要】 目的构建博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(p24蛋白)基因重组表达质粒,原核表达p24蛋白,并进行纯化。方法通过RT-PCR法从BDV感染的少突胶质细胞株(Oligodendrocyte,OL)中扩增p24基因片段,构建重组表达质粒pET-41a-p24,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达的重组蛋白进行亲和层析纯化。结果经双酶切鉴定和测序证实,重组表达质粒pET-41a-p24构建正确;表达的重组p24蛋白相对分子质量约24 000,表达量占菌体总蛋白的30%以上,主要以可溶形式表达;纯化的重组蛋白纯度达85%左右,可与鼠抗BDV p24单克隆抗体特异性结合。结论已成功原核表达并纯化了重组BDV p24蛋白,为进一步建立BDV相关免疫学检测方法奠定了基础。
【英文摘要】 Objective To construct the recombinant plasmid carrying the gene encoding Borna disease virus(BDV) phosphoprotein(p24),express in prokaryotic cells and purify the expressed product.Methods The p24 gene was amplified by RT-PCR from oligodendrocytes(OL) infected with BDV and cloned into prokaryotic expression vector pET-41a(+).The constructed recombinant plasmid pET-41a-p24 was transformed to E.coli BL21(DE3) for expression under induction of IPTG.The expressed protein was purified by affinity chromatography....
【基金】 国家重点基础研究发展计划(973计划,2009CB918300)
【更新日期】 2011-11-08
【分类号】 S852.659.5
【正文快照】 博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)是一种具有很强嗜神经性的单负链RNA病毒,是博尔纳病(Borna disease,BD)的病原体[1]。BDV宿主范围很广泛,主要宿主为马和羊,还包括啮齿类、鸟类和灵长类等众多温血动物。越来越多的证据表明,BDV可能与人类精神疾病有关[2];在我国新疆、宁

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