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银杏小孢子叶球蛋白提取和双向电泳体系优化(Ⅱ)  
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【英文篇名】 Protein Extraction from Ginkgo biloba Starninate Strobilus and Optimization of Two-Dimensional Electrophoresis Protocol
【下载频次】 ★★★☆
【作者】 杨妮娜; 崔彬彬; 孙宇涵; 李允菲; 王亚茹; 陈欣; 李云; 邓高松; 苗少波;
【英文作者】 Yang Nina(College of Biological Sciences and Biotechnology; Beijing Forestry University; Beijing 100083; P.R.China); Cui Binbin(Department of Biology and Chemistry; Baoding University); Sun Yuhan; Li Yunfei; Wang Yaru; Chen Xin; Li Yun(College of Biological Sciences and Biotechnology; Beijing Forestry University); Deng Gaosong; Miao Shaobo(Teaching and Experimental Forestry Center of Beijing Forestry University);
【作者单位】 北京林业大学; 保定学院; 北京林业大学实验林场;
【文献出处】 东北林业大学学报 , Journal of Northeast Forestry University, 编辑部邮箱 2011年 08期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 银杏; TCA/丙酮/酚; 双向电泳技术;
【英文关键词】 Ginkgo biloba; TCA-acetone-phenol; Two-dimensional gel electrophoresis;
【摘要】 以银杏小孢子叶球为材料,比较了不同的提取的方法、蛋白质裂解液组成、pH值范围以及不同质量浓度SDS-PAGE凝胶对双向电泳的影响。结果表明:TCA/丙酮/酚法比TCA/丙酮法更适合于银杏小孢子叶球蛋白的提取;含有硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ,可显著提高蛋白质的溶解性,在2-DE图谱上可分辨出748个蛋白质点,比用蛋白质裂解液Ⅰ提取的蛋白点数多620个。采用pH3-10的胶条分离时,蛋白点集中在pH=4~8,使用pH=4~7的胶条,图谱胶点重叠少,也较清晰,更利于低丰度蛋白的检出。用TCA/丙酮/酚提取蛋白,并以蛋白质裂解液Ⅱ溶解蛋白,采用pH=4~7线性17 cm的IPG胶条1,2%SDS-PAGE凝胶进行双向凝胶电泳,银杏小孢子叶球蛋白质能得到较好的分离,图谱清晰。
【英文摘要】 The effects of different protein extraction methods,lysis buffers,pH ranges of IPG strip and different gel concentrations on two-dimensional gel electrophoresis were studied by using male flower buds of Ginkgo biloba as experimental materials.Result shows that,compared TCA-acetone-phenol protocol with TCA-acetone protocol,the former is more suitable.The protein solubility of the samples dissolved in lysis bufferⅡcontaining thiourea was greatly enhanced,and about 748 protein spots were detected on 2-DE gels,...
【基金】 国家自然科学基金(30771747); 林业行业专项(201004008)
【更新日期】 2011-09-14
【分类号】 S792.95
【正文快照】 Protein Extraction from Ginkgo biloba Starninate Strobilus and Optimization of Two-Dimensional ElectrophoresisProtocol/Yang Nina(College of Biological Sciences and Biotechnology,Beijing Forestry University,Beijing 100083,P.银杏是现存种子植物中最古老的孑遗

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