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转基因玉米PCR检测体系的优化研究  
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【英文篇名】 Optimization of PCR System for Transgenic Maize
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【作者】 何春梅; 张成华; 刘强; 董瑞; 高新学; 汪黎明; 刘铁山;
【英文作者】 HE Chun-mei; ZHANG Cheng-hua; LIU Qiang; DONG Rui; GAO Xin-xue; WANG Li-ming; LIU Tie-shan(Maize Institute; Shandong Academy of Agricultural Sciences; Jinan 250100; China);
【作者单位】 山东省农业科学院玉米研究所;
【文献出处】 山东农业科学 , Shandong Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2011年 06期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 转基因玉米; PCR扩增; 反应体系;
【英文关键词】 Transgenic maize; PCR amplification; Reaction system;
【摘要】 以转基因玉米为研究材料,从模板DNA的提取质量、Mg2+浓度、退火温度、引物用量等方面对PCR检测体系进行优化,建立了检测转基因玉米中外源基因的有效PCR反应体系。在优化体系中,25mm ol/LMg2+用量由1.5μl降低为1.2μl,12.5mm ol/L引物用量由1μl降低为0.5μl,退火温度提高2℃。TouchDown PCR反应条件:95℃5m in;95℃1m in,62.5℃1m in(以后每个循环递减1℃),72℃1m in,循环15次;95℃1m in,57.5℃1m in,72℃1m in,循环20次;72℃延伸7m in。
【英文摘要】 With the transgenic maize as experiment material,the PCR system for detecting exogenous gene was optimized in extracted DNA quality,Mg2+ concentration,annealing temperature and primer dosage.In the optimized system,the dosage of 25 mmol/L Mg2+ was reduced from 1.5 μl to 1.2 μl;the dosage of 12.5 mmol/L primer was reduced from 1 μl to 0.5 μl;the annealing temperature was increased by 2℃.The Touchdown PCR reaction conditions were 95℃ for 5 min;95℃ for 1 min,62.5℃ for 1 min(1℃ decreased after each cycle),72℃ f...
【基金】 国家科技支撑计划项目(2007BAD31B03); 山东省良种工程项目资助
【更新日期】 2011-08-24
【分类号】 S513
【正文快照】 玉米是集粮食、饲料和工业原料于一体的农作物,依总产和种植面积而言,为我国第一大粮食作物,也是我国未来增产潜力最大的粮食作物,在国民经济发展中占有举足轻重的地位[1]。据有关部门分析,按照当前国内玉米的产销形势,今后5~10年,我国玉米将持续出现供不应求状况,缺口将达到6

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