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银杏HDR基因的克隆与功能分析  
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【英文篇名】 Cloning and Functional Analysis of HDR Gene from Ginkgo biloba L.
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【作者】 杨颖舫; 杨春贤; 冯国庆; 成瑜; 李郑娜; 陈敏; 廖志华;
【英文作者】 YANG Ying-fang et al (School of Life Sciences; Southwest University; Chongqing 400715);
【作者单位】 西南大学生命科学学院; 西南大学药学院;
【文献出处】 安徽农业科学 , Journal of Anhui Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2010年 13期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 HDR基因; 基因克隆; β-胡萝卜; 功能互补; 银杏;
【英文关键词】 HDR gene; Cloning; β-carotene; Functional complementation; Ginkgo biloba L.;
【摘要】 [目的]获得银杏HDR基因的克隆并研究HDR基因的功能。[方法]采用RT-PCR技术获得银杏HDR的全长cDNA,命名为Gb-HDR(GenBank登录号:DQ364231),该基因cDNA全长为1827bp,包含1425bp的开放阅读框,编码474个氨基酸残基的蛋白;并构建GbHDR的原核表达载体pTrcGbHDR,与原核表达载体pAC-BETA共转入大肠杆菌XL1-Blue,获得β-胡萝卜素工程菌。[结果]克隆获得实际长度为1441bp的GbHDR基因,该序列包含1425bp的HDR基因ORF,编码474个氨基酸残基的蛋白,其预测分子量为53.2kD,等电点预测为5.76。功能互补分析表明,GbHDR能推动工程菌XL1-Blue+pTrcGbHDR+pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,在颜色互补平板上呈现β-胡萝卜素特有的橘黄色,证实GbHDR具有典型的HDR基因功能。[结论]获得1株可高量积累β-胡萝卜素的大肠杆菌工程菌,为最终实现β-胡萝卜素代谢工程提供侯选基因和作用靶点。
【英文摘要】 [Objective] The aim was to obtain cloning of HDR gene from Ginkgo biloba L. and study its function. [Method] The coding sequence of HDR gene was cloned from Ginkgo biloba L. by reverse transcription polymerase chain reaction,which was designated as GbHDR ( GenBank accession No.: DQ364231). The cDNA full-length of GbHDR is 1 827 bp containing a 1 425-bp open reading frame (ORF) encoding a 474-amino-acid polypeptide and constructed into the prokaryotic expression vector pTrcGbHDR. The β-carotene biosynthetic ...
【基金】 国家自然科学基金(30500303)
【更新日期】 2010-06-25
【分类号】 S792.95
【正文快照】 MEP途径是一条存在于植物和细菌中的萜类物质前体合成途径,提供萜类物质生物合成的基本骨架异戊烯基焦磷酸(Isopentenyl diphosphate,IPP)和二甲基烯丙基焦磷酸(Dimethylallyl diphosphate,DMAPP)[1]。1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-but

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