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白腐真菌细胞色素P450的诱导及检测方法研究  
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【英文篇名】 Induction and Measurement of Cytochrome P450 in White Rot Fungi
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【作者】 宁大亮; 王慧; 李冬;
【英文作者】 NING Da-liang; WANG Hui; LI Dong(State Key Joint Laboratory of Environmental Simulation and Pollution Control; Department of Environmental Science and Engineering; Tsinghua University; Beijing 100084; China);
【作者单位】 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室;
【文献出处】 环境科学 , Environmental Science, 编辑部邮箱 2009年 08期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 白腐真菌; 细胞色素P450; 诱导; CO结合差光谱; 细胞破碎;
【英文关键词】 white rot fungus; cytochrome P450; induction; CO difference spectrum; cell disruption;
【摘要】 以CO结合差光谱为基本检测法,研究了白腐真菌黄孢原毛平革菌中细胞色素P450的诱导和适宜的分离检测方法.结果表明,正己烷对该真菌P450有显著的诱导作用,P450诱导量受正己烷浓度和诱导时间的影响,每小时投加正己烷2μL/mL、诱导6 h可使该真菌微粒体P450比浓度高达140~160 pmol/mg.在此基础上,本研究优化了分离P450时破碎细胞的方法以及光谱法检测P450的条件.破碎细胞时,采用高速分散结合玻璃研磨,比采用玻璃研磨、超声破碎和珠磨等方法分离的微粒体P450含量高1~5倍,是更为适宜的破碎方法.检测CO结合差光谱时,通气和还原条件对P450检测值有显著影响,较适宜的条件为:样品池和对照池分别通入等量的CO和N2,通气流量为3 mL/min(300μL样本),通气时间40 s;通气后投加还原剂低亚硫酸钠,投加浓度为0.4 mol/L.
【英文摘要】 The induction and measurement of cytochrome P450 in white rot fungus Phanerochaete chrysosporium were studied in this work.The spectrophotometric results demonstrated that n-hexane was able to induce the fungal P450 to high level,which facilitated isolation and measurement of microsomal P450.The highest concentration of microsomal P450 could reach 140~160(pmol/mg) after 6-h-induction by addition of 2(μL/mL) hexane each hour,and the concentration of hexane and incubation time had significant effect on the in...
【基金】 国家自然科学基金项目(30400012); 国家重点基础研究发展规划(973)项目(2004CB418506)
【更新日期】 2009-08-21
【分类号】 X172
【正文快照】 白腐真菌是一类可降解木质素、营腐生生活的白色丝状真菌,多数属于担子菌纲.白腐真菌的模式菌种黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)对多环芳烃、多氯联苯、二英等许多有机污染物都有明显的降解功能[1],其降解酶系和作用机制是环境微生物领域的热点问题.细胞色素P450(

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