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采用正交设计方法优化梨ISSR-PCR反应体系  
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【英文篇名】 Optimizing ISSR-PCR System of Pear by Orthogonal Design
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【作者】 曾艳玲; 谭晓风; 曾晓峰;
【英文作者】 ZENG Yan-ling; TAN Xiao-feng; ZENG Xiao-feng(The Key Lab.of Non-wood Forest Product of Forestry Ministry; Central South University of Forestry and Technology; Changsha 410004; China);
【作者单位】 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室;
【文献出处】 湖北农业科学 , Hubei Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2008年 11期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 ; 正交设计; ISSR-PCR;
【英文关键词】 pear; orthogonal design; ISSR-PCR;
【摘要】 采用正交设计的方法对梨ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用DPS数据处理软件分析,建立的梨ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶1.0U、Mg2+的浓度2.0 mmol·L-1、模板DNA 10~80 ng、dNTPs 0.10 mmol·L-1、引物0.3μmol·L-1。对梨ISSR-PCR最佳反应体系进行了梯度退火试验,得到的最佳退火温度为55℃。
【英文摘要】 In this paper,the orthogonal design was used to optimize ISSR-PCR amplification system on pear in four levels of five factors(Taq DNA polymerase,Mg2+,DNA template,dNTP,and primer) respectively.The result of PCR was analyzed by software DPS,and the most suitable ISSR-PCR system for pear was established,it’s 20μL reaction system contained 1.0U Taq DNA polymerase,2.0 mmol.L-1 Mg2+,10~80ng DNA template,0.10 mmol.L-1 dNTPs,0.3 μmol.L-1 primer.The optimal annealing temperature for ISSR-PCR reaction was 55℃ propos...
【基金】 湖南省科技三项基金(No.00JZYZ115); 中南林业科技大学青年科学基金项目(No.0700913)
【更新日期】 2009-01-14
【分类号】 S661.2
【正文快照】 梨属于蔷薇科(Rosaceae),梨属(Pyrus.L)植物,在世界各地广泛栽种[1]。中国主要栽培的种类有白梨(Pyrus bretschneideri Rehd)、秋子梨(P.ussurien-sis Maxim.)、砂梨(P.pyrifolia(Burm.)Nakai)、新疆梨(P.sinkiangensis Yu)、西洋梨(P.communis Linn)等5个系统,品种众多,亲缘关

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