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芥蓝黑芥子酶基因的克隆与原核表达  
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【英文篇名】 Cloning and prokaryotic expression of myrosinase gene from Chinese kale(Brassica oleracea L. var. alboglabra Bailey)
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【作者】 谢丽雪; 黄科; 李宾; 黄志伟; 郑金贵;
【英文作者】 XIE Li-xue1; 2; HUANG Ke1; 3; LI Bin1; HUANG Zhi-wei1; ZHENG Jin-gui1(1.Agricultural Product Quality Institute; Fujian Agriculture and Forestry University; Fuzhou; Fujian 350002; China; 2.Fujian Fruit Institute; Fujian Academy of Agricultural Science; Fujian 350013; 3.Crop Institute; China);
【作者单位】 福建农林大学农产品品质研究所;
【文献出处】 福建农林大学学报(自然科学版) , Journal of Fujian Agriculture and Forestry University(Natural Science Edition), 编辑部邮箱 2008年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 异硫氰酸盐; 黑芥子酶; 芥蓝; 克隆; 原核表达;
【英文关键词】 isothiocyanates; myrosinase; Chinese kale; clone; prokaryotic expression;
【摘要】 根据GenBank上已公布的植物黑芥子酶基因序列设计引物,采用RT-PCR和3′/5′-RACE相结合的方法,从芥蓝中克隆出黑芥子酶基因全长cDNA序列.序列全长为1832 bp,开放阅读框为1647 bp,编码549个氨基酸,含有糖基水解酶家族Ⅰ(Glyco_hydro_1)活性位点,GenBank登录号为DQ767973.该核苷酸序列与十字花科其他植物的黑芥子酶基因序列具有较高的同源性,同油菜、萝卜、芥菜和大白菜的同源性达90%以上.利用pET28-α(+)构建芥蓝黑芥子酶基因的原核表达载体,转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表明表达蛋白的分子质量约为65 ku.
【英文摘要】 A pair of high conserved primers were designed according to the cDNA sequences of myrosinase genes published in GenBank.The full-length cDNA of myrosinase gene was coloned from Chinese kale using RT-PCR and 3′/5′ RACE.Nucleotide sequence analysis results showed that the full sequence of myrosinase gene was 1832 bp,including 1647 bp of ORF.The ORF encoded a peptide of 549 amino acid residues and had Glyco_hydro_1 site.This sequence has been registered on GenBank and the GenBank accession number is DQ767973.C...
【基金】 国家重大基础研究前期研究专项(2005CCA01300); 福建省科技厅重大专项(2005NZ1022); 国家自然科学基金(30600415); 福建省科技创新平台建设项目(2007S1001); 国家科技项目备案(F2005CCAO1300)资助
【更新日期】 2008-11-06
【分类号】 S634;Q943.2
【正文快照】 流行病学研究表明,多吃蔬菜可以降低癌症发生的危险性[1].十字花科蔬菜具有显著的抗癌、防癌作用,其中起主要作用的是以芥子油苷(glucosinolates,GS)为前体而存在的异硫氰酸盐(isothiocyanates,ITCs)[2].ITCs可提高机体免疫力,增强抗氧化、抗突变和抗肿瘤能力,对肝癌、乳腺癌、

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