毛细管电泳快速检测限制性内切酶酶切产物-中国学术期刊网络出版总库

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毛细管电泳快速检测限制性内切酶酶切产物

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【英文篇名】	Rapid Detection on the Enzyme-digested Products of Restriction Endonuclease by Using Capillary Electrophoresis
【下载频次】	★★★★★
【作者】	刘圆圆; 王荣; 郭光沁; 郭志强;
【英文作者】	LIU Yuan-yuan et al (Life Science College; Lanzhou University; Lanzhou; Gansu 730000);
【作者单位】	兰州大学生命科学学院; 兰州军区兰州总医院; 兰州军区兰州总医院甘肃兰州; 甘肃兰州;
【文献出处】	安徽农业科学 , Journal of Anhui Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2008年 10期期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	毛细管电泳; 限制性内切酶; 酶切产物; 检测;
【英文关键词】	Capillary electrophoresis; Restriction endonuclease; Enzyme-digested products; Detection;
【摘要】	[目的]建立1种利用毛细管电泳快速、高效检测限制性内切酶酶切产物的方法。[方法]以甲基纤维素(MC)为筛分介质,用PBR322/BsuRⅠDNA Marker为试验对象,研究筛分介质浓度、pH值、毛细管柱温度和电场强度对毛细管电泳法分离小片段双链DNA的影响,寻求最佳电泳条件,并将此方法用于检测MspⅠ内切酶的酶切产物。[结果]MC浓度对双链小片段DNA的分离度有较大影响。随MC溶液浓度的增加,分离度呈先增后减的趋势。毛细管电泳的最佳条件为:MC浓度为2.0%,pH值为8.0,毛细管柱温度15℃,电场强度为275 V/cm。在此条件下,对MspⅠ内切酶的酶切产物进行检测,在20 min内检测到3个酶切片段。[结论]与平板凝胶电泳相比,运用毛细管电泳检测小片段限制性内切酶酶切产物更高效。
【英文摘要】	[Objective] The research aimed to establish a kind of rapid and effective method for detecting the enzyme-digested products of restriction endonuclease by using capillary electrophoresis.[Method] With methyl cellulose(MC) as sieving matrix,PBR322/BsuRⅠDNA Marker was taken as test object to study the effects of the concn.of the sieving matrix,pH value,the capillary column temperature and electric field intensity on separating small double-chain DNA fragment by using capillary electrophoresis and seek the opt...
【基金】	国家自然基金资助项目(20775089); 甘肃省自然基金资助项目(ZS031-A25-70-E); 中国博士后基金资助项目(2005037576)
【更新日期】	2008-06-12
【分类号】	Q78
【正文快照】	高效毛细管电泳(CE)由于分离迅速、高效、优质、自动化、样品用量少并能定量等优点使其在短短几年内得到飞速发展,已成为检测DNA、限制性内切酶酶切产物、PCR扩增产物的主要工具。一般将电解质溶液放入水溶性高分子聚合物的溶液体系,称为无胶筛分(non-gel sieving,NGS)电泳体系

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