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【英文篇名】 |
Study on Optimization for ISSR Reaction System of Larix using Orthogonal Design |
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【下载频次】 |
★★★★★ |
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【作者】 |
林萍;
张含国;
谢运海; |
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【英文作者】 |
LIN Ping~1;
ZHANG Han-guo~2;
XIE Yun-hai~2(1.Forestry Research Institute of Heilongjiang Province;
Harbin 150040;
2.Department of Forestry;
Northeast Forestry University;
China); |
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【作者单位】 |
中国林科院黑龙江分院;
东北林业大学林学院遗传育种室;
东北林业大学林学院遗传育种室 黑龙江哈尔滨;
黑龙江哈尔滨; |
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【文献出处】 |
生物技术
, Biotechnology, 编辑部邮箱
2005年 05期
期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
落叶松;
ISSR-PCR;
正交设计;
反应体系; |
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【英文关键词】 |
Larix;
orthogonal design;
ISSR-PCR;
reaction system; |
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【摘要】 |
该文利用正交试验设计的方法,对落叶松ISSR-PCR反应的5因素4水平进行试验,试验结果运用MINITAB软件进行分析,建立了落叶松ISSR-PCR反应的最佳体系,即在20μl反应体系中,模板50-200 ng,0.5μmol/L的引物,1×反应缓冲液,dNTP为0.15mmol/L-0.2mmol/L,1U的TaqDNA聚合酶,Mg2+2.0mmol/L-2.5 mmol/L。并进一步进行梯度退火试验,找到了最适的落叶松ISSR退火温度为56.4℃。 |
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【英文摘要】 |
In this paper,the orthogonal design was used to optimize ISSR amplification system of Larix in five factors(Mg~(2+),dNTP,primer,Taq polymerase,DNA templet) at four levels respectively.The data were analyzed by soft ware MINITAB.A suitable ISSR reaction system was established,namely 20 μl reaction system containing 50-200 ng DNA templet,0.5 μmol/L primer,1×PCR buffer,0.15 mmol/L-0.2 mmol/L dNTP,1U Taq DNA polymerase,2.0 mmol/L-2.5 mmol/L Mg~(2+).The optimal annealing temperature for ISSR-PCR reaction was pro... |
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【基金】 |
黑龙江省博士后启动基金;
东北林业大学科研启动基金项目资助 |
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【更新日期】 |
2005-11-25 |
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【分类号】 |
S791.22; |
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【正文快照】 |
Zietkiewicz E,et al.[1]于1994年创建了锚定SSR(Inter Sim-ple Sequence Repeat,ISSR)DNA标记技术后,该技术由于多态性水平高,可重复性好,DNA用量少,成本低等优点,近年来在品种鉴定[2-4]、种质资源和遗传多样性研究[4-7]中得到了广泛的应用,并作为构建遗传图谱的工具[8,9]。虽 |
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