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抗J亚群禽白血病病毒的鸡胚成纤维细胞系建立  
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【英文篇名】 Development of Chicken Embryo Fibroblast Cell Line Resistant to J Subgroup Avian Leukosis Virus(ALV-J) Infection
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【作者】 叶建强; 秦爱建; 邵红霞; 刘红梅; 金文杰; 刘岳龙;
【英文作者】 YE Jian-qiang; QIN Ai-jian; SHAO Hong-xia; LIU Hong-mei; JIN Wen-jie; LIU Yue-long(Key Laboratory of Jiangsu Preventive Veterinary Medicine; Yangzhou University; Yangzhou 225009; Jiangsu; China);
【作者单位】 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室; 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室 江苏扬州; 江苏扬州;
【文献出处】 病毒学报 , Chinese Journal of Virology, 编辑部邮箱 2005年 06期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 J亚群禽白血病病毒; env基因; 表达; 细胞系; 抗病毒感染;
【英文关键词】 ALV-J; env gene; expression; cell line; anti-virus infection;
【摘要】 将J亚群禽白血病病毒囊膜基因(ALV-Jenv)插入pcDNA3.1真核表达载体,构建成转移载体pcDNA-env,并转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,通过Zeocin药物筛选获得转染阳性细胞。细胞经传30代后,冻存。13个月后复苏,置不含药物的培养基中传代培养。连续传40代后,分别用PCR、Southern blot、间接免疫荧光(IFA)及Western blot对该细胞中的env基因进行了检测,并进行了抗病毒感染分析。研究结果表明,通过Zeocin药物筛选获得了稳定表达ALV-Jenv基因的鸡胚成纤维细胞系,命名为pcDNA-env-DF-1细胞。该细胞在体外抗ALV-J感染试验中,能抵抗1×104个TCID50病毒感染量,提示所构建的细胞系具有良好的抗病毒作用。这一细胞系的构建为研究ALV-J Env蛋白与宿主细胞表面受体相互作用分子机理提供了很好的工具。
【英文摘要】 The recombinant plasmid pcDNA-env was constructed by inserting the env gene of ALV-J into the vector pcDNA3.1.Chicken embryo fibroblast cell line DF-1 was transfected with the recombinant plasmid pcDNA-env by Lipofectin.Then the transfected DF-1 cells were analyzed for transient ALV-J env expression by indirect immunofluorescence assay(IFA) and were selected for resistant cells to Zeocin.The Zeocin-resistant cells were passaged for 30 generations and then frozen.After 13 months,these cells were refreshed an...
【基金】 江苏省教委自然基金重点项目(OOKJB230002); 国家十五攻关(2002BA514A-18-7)
【更新日期】 2006-02-27
【分类号】 S852.65
【正文快照】 禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是一类禽反转录病毒,其前病毒基因组结构主要由LTR-gag-pol-env-LTR组成,其中env基因编码的囊膜蛋白是该类病毒的主要表面蛋白。该蛋白与靶细胞表面特异性受体相互识别、结合,是病毒进入靶细胞进行复制、增殖所必需的[1]。当细胞表面特?

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