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怀地黄ISSR扩增条件优化的研究(英文)  
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【英文篇名】 Optimization of ISSR-PCR amplification in Huai Rehmannia glutinosa
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【作者】 周延清; 景建洲; 李振勇; 浩健; 贾敬芬;
【英文作者】 ZHOU Yan-qing~1; JING Jian-zhou~2; LI Zhen-yong~2; HAO Jian~2; JIA Jing-fen~(1*) (1 College of Life Sciences; Northwest University; Xi'an 710069; China; 2 Postdoctoral Programme; Sino-American Biotechnology Company; Luoyang; Henan 471003; 3 Department of Biological and Biotechnology Tsinghua University; Beijing 100084; China);
【作者单位】 西北大学生命科学学院; 华美生物工程公司博士后工作站; 西北大学生命科学学院 西安; 河南洛阳;
【文献出处】 西北植物学报 , Acta Botanica Boreali-occidentalia Sinica, 编辑部邮箱 2004年 01期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 怀地黄; ISSR; PCR; 条件优化;
【英文关键词】 Huai Rehmannia glutinosa Libosch.; ISSR; PCR; optimization;
【摘要】 用CTAB法提取怀地黄嫩叶DNA,进行简单重复间序列标记 ISSR 分析.通过单因子实验分别研究了退火温度、Taq酶单位、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响,找出各自的合适条件,而且每一个合适条件确定以后都被作为后续研究的一个条件.通过各个因子的组合研究建立了适宜于怀地黄ISSR分析的扩增体系:25μLPCR反应体积,1×TaqDNA酶缓冲液 10mmol/LTris-HCl,50mmol/LKCl,0.1%TrionX-100,pH9.0 ,2.5mmol/LMgCl2,1.5~1.0UTaq酶,60ng模板DNA,0.4μmmol/L引物,各0.4mmol/L的dATP、dGTP、dCTP和dTTP.合适的退火温度为53~55℃.为用ISSR技术分析鉴定怀地黄种质资源奠定了良好的基础.
【英文摘要】 Huai Rehmannia glutinosa Libosch. genomic DNA,extracted from its fresh young leaves by CTAB method,was used as ISSR-PCR amplification template.The effects of main elements,i.e.temperature,Taq polymerase dosage,dNTP concentration,Mg~(2+) concentration,primer concentration and template DNA concentration on ISSR-PCR amplication were tested by single factor experiment,respectively,to determine its optimal levels and establish the following optimal reaction system for ISSR analysis in Huai Rehmannia glutinosa Li...
【更新日期】 2005-08-19
【分类号】 Q943
【正文快照】 ISSR inter- simple sequence repeat is a newkind of DNA markers putforward by Zietkiewiczetal[1] 1 994 .It is a technique in which primers an-nealing to microsatellites MS during PCR lead tamplification of the piece of DNA between twoprimers that are wit

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