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葡萄总RNA提取方法的研究

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【英文篇名】	An Improved Method for Rapidly Extracting Total RNA from Vitis
【下载频次】	★★★★★
【作者】	张今今; 王跃进; 王西平; 杨克强; 杨进孝;
【英文作者】	Zhang Jinjin; Wang Yuejin ; Wang Xiping; Yang Keqiang; and Yang Jinxiao (Horticultural College; Northwest Science&Technology University of Agriculture&forestry; Yangling; Shaanxi712100China);
【作者单位】	西北农林科技大学园艺学院; 西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌; 陕西杨凌;
【文献出处】	果树学报 , Journal of Fruit Science, 编辑部邮箱 2003年 03期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	葡萄; 多酚; 多糖; SDS/酚法; 总RNA提取;
【英文关键词】	Vitis; Polyphenolics; Polysaccharides; SDS/Phenol; Total RNA extraction;
【摘要】	针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了改进SDS/酚法、异硫氰酸胍法和市售总RNA提取试剂盒等不同的提取方法,3种改进方法均能从葡萄幼嫩叶片中提取到总RNA。其中改进的SDS/酚法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,能够从成熟的叶片和完熟果实的果皮中获得质量高、完整性好的总RNA,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,A260/A280介于1.8～2.0之间,A260/A230大于2.0,且总RNA产率高,其中幼叶总RNA产率为261.20μg/g,成熟叶产率为191.40μg/g,完熟果皮产率为31.50μg/g,完全适于进行DDRT-PCR、Northernbolt和cDNA文库构建等研究。且该方法具有快速、简单、有效的特点。
【英文摘要】	Extracting high-quality RNA from grapevine tissues are particularly difficult due to high levels of polyphenolics and polysaccharides,or other compounds that bind and/or coprecipitate with RNA.The modified SDS/phenol,guanidinum thiocyanate and commercial total RNA extraction kit were applied to isolate high purity and integrity RNA from grapevine.The normal component of the total RNA isolation method is the addition of polyvinylpyrrolidone(PVP)andβ-mercaptoetha-hol in the extraction buffer to SDS/phenol an...
【基金】	国家自然科学基金资助项目(39970524和30170653); 863计划(2001AA241172); 国家“十五”科技攻关项目(2002BA515B11)。
【分类号】	S663.1
【正文快照】	葡萄是世界性的重要经济作物,研究葡萄抗病基因或防卫基因的表达及其抗病机制,是葡萄抗病遗传育种的重要内容。总RNA提取是从事这方面研究的基本环节之一。但葡萄组织中含有大量的多酚和多糖类物质犤1犦,酚类化合物在匀浆时极易被氧化成醌类物质,与RNA不可逆地结合,从而影响RNA

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