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猪嗜中性粒细胞cAMP磷酸二酯酶的提取与活性检测  
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【英文篇名】 Extraction and Activity Detection of cAMP-Phosphodiesterase from Porcine Neutrophils
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【作者】 陈武; 姜代勋; 杨柳; 胡燕; 张春霞; 于同泉; 路苹;
【英文作者】 CHEN Wu; JIANG Dai-Xun; YANG Liuet al(Beijing Agricultural College; Beijing 102206);
【作者单位】 北京农学院动物科学技术系; 北京市农业应用新技术重点实验室; 北京市农业应用新技术重点实验室 北京; 北京102206;
【文献出处】 北京农学院学报 , Journal of Beijing Agricultural College, 编辑部邮箱 2003年 04期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 cAMP; 磷酸二酯酶; ; 嗜中性粒细胞;
【英文关键词】 cAMP; phosphodiesterase; swine; neutrophils;
【摘要】 目的:提取动物体的cAMP磷酸二酯酶(PDE),并检测其活性,为兽医临床研究PDE活性的生理病理变化和中西药物对PDE活性调节作用建立实验方法。方法:猪血经过葡聚糖沉降,淋巴细胞分离液分离,特殊分离液洗涤和红细胞溶胀后,获得嗜中性白细胞。嗜中性白细胞破碎后释放PDE,通过反相高效液相色谱(RP HPLC)法测定反应体系中cAMP的含量,根据底物(cAMP)的减少量,确定嗜中性白细胞中PDE活性。结果:经显微镜计数嗜中性粒细胞纯度达95%;酶量在10~40μl间对cAMP的分解率为9 90%~31 39%,与PDE活性之间存在直线相关关系(r=0 99)。结论:猪嗜中性粒细胞中含有高纯度、高活性的cAMP PDE;高效液相色谱法可以准确测定PDE反应前后cAMP含量的变化;两种方法结合可以作为兽医临床研究机体PDE活性变化和中西药物对PDE活性调节作用的新方法。
【英文摘要】 An experimental method was established by extracting cAMP-phosphodiesterase (PDE) from porcine neutrophils and detecting its activity, which can be used in veterinary clinic to explore its physiological and pathological changes, and to study the regulative effects of Chinese herbs and western medicine on its activity. Porcine neutrophils were obtained from porcine whole blood that was separated to remove erythrocytes with dextran and to separate lymphocytes with Ficoll Solution, and then cleaned with specia...
【基金】 国家自然科学基金(30270978); 北京市科技新星计划(9558100500); 市教委、北京市农业应用新技术重点实验室资助
【分类号】 S852.33
【正文快照】 2003年10月Oct.,20033’,5’ 环腺苷酸(cAMP)是细胞信息转导中重要的第二信使物质,与动物的生长发育、生产性能以及疾病的预防和治疗均有着密切的关系。细胞内cAMP水平主要决定于其生成与失活的相对速度。cAMP的合成受腺苷酸环化酶(AC)调节,分解由环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)完成,

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