噬菌体展示技术筛选藻毒素结合多肽、毒素调查及甲藻钙调蛋白基因的研究-中国博士学位论文全文数据库

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噬菌体展示技术筛选藻毒素结合多肽、毒素调查及甲藻钙调蛋白基因的研究

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【英文题名】	Screening Ligands of Microcystin by Phage Display Technique、microcystin Survey and Preliminary Study on Calmodulin Gene in Dinoflagellate
【作者】	温若冰;
【导师】	包振民; 隋正红;
【学位授予单位】	中国海洋大学;
【学科专业名称】	海洋生物学
【学位年度】	2011
【论文级别】	博士
【网络出版投稿人】	中国海洋大学
【网络出版投稿时间】	2011-12-02
【关键词】	噬菌体展示; 微囊藻毒素; 钙调蛋白; 甲藻;
【英文关键词】	Phage display; Microcystin; Calmodulin; Dinoflagellate;
【中文摘要】	近年来,随着全球范围内有毒藻华发生次数的增加,对人类危害程度的加剧,有毒赤潮已成为一个全球性的环境问题受到人们的普遍的关注。相关的研究如藻华与环境因素的关系、对生态系统的危害、藻毒素检测和藻种鉴定等方面都已取得了较多研究成果。分子生物学技术以其快速、简易及高灵敏度等特点,已经越来越多的被应用于藻毒素及藻种定性、定量的分析。另一方面,对赤潮藻生长增殖及对环境因子响应的分子机理的研究有利于更好的检测及预报赤潮的爆发,这方面的研究也逐渐受到人们的重视。本文利用噬菌体展示技术、酶联免疫方法(ELISA)和荧光定量PCR的方法,对水体中藻毒素,特别是微囊藻毒素的分子检测和赤潮藻生长增殖、应激的分子机理进行了研究。 (1)利用噬菌体展示随机十二肽库对微囊藻毒素进行亲和筛选。经过五轮筛选噬菌体克隆回收率从2×10-5增加到3.7×10~(-2),目标噬菌体克隆得到了有效富集。从第四轮和第五轮所筛选到的噬菌体克隆中随机挑取70个噬菌斑,使用酶联免疫法检测其单克隆的特异性,结果显示63个克隆为强阳性。挑取其中的10个克隆进行序列分析,结果显示多肽序列没有明显的一致性,但富含色氨酸小的基序在9个克隆中均出现,表明色氨酸可...
【英文摘要】	Over the last several decades, harmful algal blooms (HABs) have emerged as a global concerned environmental problem due to its escalating trend in occurrence and great threat to health of wildlife and human. Multidisciplinary researches ranging from molecular and cell biology to large-scale field surveys, numerical modeling, and remote sensing from space are conducted to study HABs. Due to their virtues of rapid analysis speed and high sensitivity, emerging molecular techniques have been more and more appli...
【更新日期】	2011-12-20

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