【英文题名】
RNA Interference-based Transgenic Maize Resistant to Maize Dwarf Mosaic Virus
【作者】
张志勇 ;
【导师】
李晚忱 ;
【学位授予单位】
四川农业大学 ;
【学科专业名称】
生物化学与分子生物学
【学位年度】
2010
【论文级别】
博士
【网络出版投稿人】
四川农业大学
【网络出版投稿时间】
2011-11-25
【关键词】
农杆菌介导 ;
矮花叶病毒 ;
玉米 ;
RNA干扰 ;
转基因 ;
【英文关键词】
Agrobacterium-mediated transformation ;
dwarf mosaic virus ;
maize ;
RNA interference ;
transgene ;
【中文摘要】
玉米矮花叶病是由玉米矮花叶病毒感染引起的病害,在全国及世界各玉米产区均有流行,对玉米生产危害严重。目前,玉米矮花叶病的防治主要有调整播期、清除杂草和拔除病株等农艺措施和传播媒介昆虫的化学药剂控制。但是,由于玉米矮花叶病毒主要靠蚜虫以非持续性的方式传播,这些防治措施不仅增加生产成本,而且防治效果欠佳,往往不能有效解除矮花叶病对玉米生产的危害。选育推广抗病品种是防治玉米矮花叶病最为经济的途径。但是,由于抗病种质资源有限,抗病性的遗传性质复杂,在常规抗病育种中很难将抗病性与产量、品质等优良的农艺性状有机结合,培育出满足农业生产需要的抗病品种。
由双链RNA介导的RNA干扰,可特异性地降解细胞内与双链RNA同源的mRNA,限制同源基因的表达。本研究根据RNA干扰的原理,克隆玉米矮花叶病毒外壳蛋白(CP)基因和P1蛋白基因不同长度的片段,构建CP和P1基因反向重复序列植物表达载体,通过农杆菌介导法转化玉米自交系“18-599”的胚性愈伤组织,筛选分化再生植株,经特异PCR扩增和Southern杂交鉴定后,对T2代转基因株系进行田间接种抗病性鉴定,并用荧光定量PCR和双抗体夹心酶联免疫吸附分析检测转基因株系与对照...
【英文摘要】
Maize dwarf mosaic virus (MDMV) is a worldwide pathogenic virus causing serious yield loss in maize. Strategies for the management of the virus diseases normally include control of vector population using insecticides, adjusting seedtime, appropriate cultural practices. However, these methods have their own defects and ineffective because of the non-persistent model of virus transmission by aphids. The deployment of resistant germplasm is an environmentally-sustainable and effective way for controlling viru...
【更新日期】
2011-12-20
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