【英文题名】
Establishment of Tissue-like Hepatocellular Carcinoma Models, Lung-Invasive Related Protein Screening
【作者】
唐建华 ;
【导师】
刘银坤 ;
【学位授予单位】
复旦大学 ;
【学科专业名称】
生物化学与分子生物学
【学位年度】
2010
【论文级别】
博士
【网络出版投稿人】
复旦大学
【网络出版投稿时间】
2011-10-21
【基金】
国家自然科学;
【关键词】
肝癌 ;
类组织体 ;
三维培养 ;
肺侵袭转移 ;
iTRAQ ;
【英文关键词】
HCC ;
Spheroid ;
Three-dimensional culture ;
Lung-invasive ;
iTRAQ ;
【中文摘要】
平面培养模型是研究肝癌的发生发展和转移复发机制的较好模型,三维培养模型在平面培养模型的基础上更接近在体状况。目前还缺乏在三维状态下研究肝癌侵袭、转移等分子机制的实验模型。本研究应用了旋转壁式生物反应器和PLGA支架材料,旋转壁式反应器具有微重力和低剪切力的特点,PLGA生物支架能更好地支撑细胞形成的类组织结构。本文首先将人高转移性肝癌细胞MHCC97H利用生物反应器进行有PLGA支架的三维培养,MHCC97H细胞和支架粘附形成团块,随着培养时间的延长,细胞团聚集体更加紧密,且表面光滑,行成高转移潜能肝癌类组织体；组化显示,细胞紧密排列,电镜超微结构显示类组织体细胞具有了组织细胞特有的一些结构,例如桥粒和紧密连接。临床上葡萄糖、LDH、ALB、γ-GT和AFP常用来评价肝组织功能。与平面培养细胞相比,类组织体形成过程中葡萄糖消耗下降,LDH分泌增加,显示在类组织体形成过程中葡萄糖分解增强而葡萄糖氧化受到了抑制；类组织体形成过程中,y-GT和AFP的分泌也明显高于平面培养细胞,这些结果显示类组织体获得了HCC特征性酶(蛋白)产生和分泌的能力,并且结果同HCC病人血清病理特征一致。与平面培养细胞相比,流式细胞技术显...
【英文摘要】
Two Dimensional (2D) cell culture model have good application in Hepatocellular carcinoma (HCC) study and three dimensional (3D)culture model have advanced the existing research for the tissue-like characteristic. There have been short of the experimental models under 3D conditions to study the HCC invasive and metastatic mechanisms. The investigation applied rotating wall vessel (RWV) system and PLGA scaffold material, RWV system has the features of low gravity and low shearing force. PLGA biological mater...
【更新日期】
2011-12-20
【相同导师文献】
导师：刘银坤 导师单位：复旦大学 学位授予单位：复旦大学肝细胞癌早期发现多重定量抗体芯片的构建及临床验证 [D]. 复旦大学,2012骨桥蛋白在肝癌中的表达及与转移相关的糖基化改变 [D]. 复旦大学,2012干细胞因子NANOG、SOX2在肝细胞癌中的表达及其调控肝细胞癌转移的分子机制 [D]. 复旦大学,2013三维肝癌类组织体模型建立及肺侵袭关联蛋白筛查 [D]. 复旦大学,2010肝病中血清结合珠蛋白β亚基的N-糖基化修饰及意义 [D]. 复旦大学,2012大鼠肝卵圆样细胞WB-F344致瘤性转化过程中转录组和蛋白质组的动态变化 [D]. 复旦大学,2008小鼠胚胎干细胞定向分化为肝细胞过程中转录组和蛋白质组的动态变化 [D]. 复旦大学,2009stathmin表达及其磷酸化状态在肝癌发生发展中的作用 [D]. 复旦大学,2010乙肝病毒相关肝病血清分子标志物的筛选、验证和诊断价值 [D]. 复旦大学,2011染色体8p肝癌转移相关基因的筛选和HTPAP基因功能初步研究 [D]. 复旦大学,2002
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