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基于大豆酯酶的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法研究     在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】 Studies on Rapid Detection Method for Organophosphate and Carbamate Pesticide Residues Based on Soybean Esterase
【作者】 李建科;
【导师】 胡秋辉;
【学位授予单位】 南京农业大学;
【学科专业名称】 食品科学
【学位年度】 2006
【论文级别】 博士
【网络出版投稿人】 南京农业大学
【网络出版投稿时间】 2007-01-08
【关键词】 有机磷; 氨基甲酸酯; 大豆酯酶; 酶学特性; 快速检测;
【英文关键词】 organophosphate; carbamate; soybean esterase; characteristic of enzyme; rapid detection;
【中文摘要】 本文以酶检测法为出发点,寻找良好的植物酶源替代动物乙酰胆碱酯酶,系统研究了大豆植物酯酶的提取、分离和纯化,并进行了较为系统的酶学特性表征,研究和建立了多种形式的大豆酯酶农药残留快速检测方法和体系。主要研究结果如下: 1.大豆酯酶水提取的最佳条件为:大豆种子粉碎,料液比1:5,振荡或搅拌处理30min左右,4℃冰箱静置过夜,过滤离心即得大豆酯酶粗酶液;大豆酯酶的磷酸盐缓冲液抽提和分离纯化条件为:大豆种子经拣选、粉碎,以1:5料液比加0.3moL/LpH 7.0PBS抽提,震荡或搅拌处理30min,4℃冰箱静置浸提过夜,纱布过滤,差速离心(6000rpm-1000rpm),60%硫酸铵盐析沉淀,透析,超滤浓缩得粗酶液,经DEAE-32离子交换层析,收集酶活性峰即得大豆酯酶纯酶制品,再经浓缩得浓缩酶液,或冷冻干燥得大豆酯酶冻干粉,-20℃低温冷冻保存。所得酶活力为62.48 U/mL,比活力为6.455 U/mg.pro.经各步纯化及浓缩后,对酶的提纯倍数可达90.92倍,酶的回收率为6.32%。 2.研究了大豆酯酶的酶学特性:大豆酯酶的Km值为2.97μmoL/L;酶促反应的适宜温度为25℃-40...
【英文摘要】 The aim of this study is to explore the possibilities to gain the sensitive phyto-enzyme to organophosphate and carbamate pesticides in order to replace animal-origin acetycholinesterase (AChE). Therefore, a systemic study has been taken from the probe into the sensitive enzyme, which includes extraction, separation, purification and its properties, to establish the new methods for rapid detection the pesticide residues based on the soybean esterase.The main results are as follows:1. The optimal conditions ...
【更新日期】 2010-06-25

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导师:胡秋辉    导师单位:南京农业大学    学位授予单位:南京农业大学
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