【英文题名】
Effect of Compatible Solute Ectoine on the Stability of Enzymes
【作者】
王越 ;
【导师】
张苓花 ;
【学位授予单位】
大连海事大学 ;
【学科专业名称】
环境科学
【学位年度】
2011
【论文级别】
博士
【网络出版投稿人】
大连海事大学
【网络出版投稿时间】
2011-08-01
【关键词】
Ectoine ;
酶 ;
热稳定性 ;
有机相 ;
机理 ;
【英文关键词】
Ectoine ;
Enzyme ;
Thermalstability ;
Organic Media ;
Mechanism ;
【中文摘要】
环形氨基酸Ectoine (1,4,5,6-四氢-2-甲基-4-嘧啶羧酸)是由嗜盐菌在高渗透压诱导下合成的一种具有两性离子特性的渗透压补偿性溶质,对蛋白质、核酸、细胞等在逆环境下具有保护作用。本论文以植酸酶和脂肪酶为酶蛋白,从发酵制备、对酶的保护应用和作用机理等方面对Ectoine进行了研究。
从盐池淤泥中筛选了一株中度嗜盐菌B2。细胞抽提物中经1 H-NMR鉴定含有Ectoine。菌株经16S rDNA鉴定属于盐单胞菌属(Halomonas sp.)。在含2mol/L NaCl的谷氨酸单钠培养基中发酵合成Ectoine最大量达到3.5g/L。
通过与其他补偿性溶质比较,考察了Ectoine对植酸酶(PHYAⅡ)的热稳定性保护作用。研究了Ectoine的添加量、保护方式及对PHYAⅡ高温水解的影响。实验结果表明,Ectoine作为PHYAⅡ的热稳定性保护剂,用量最少,保护作用好。
利用PHYAⅡ失活热力学和动力学分析,结合紫外和荧光光谱技术,推测Ectoine提高了酶热稳定性的作用机理。结果表明,Ectoine可以提高酶分子ΔU*、ΔH*、ΔG*和t1/2,降低失活速率常数k；荧光、紫...
【英文摘要】
The cyclic amino acid ectoine (1,4,5,6-tetrahydro-2-methyl-4-pyrimidine carboxylic acid), one of the representative compatible solutes with the characteristic of zwitterions, accumulates in halophilic and halotolerant bacteria. Previous studies indicated that ectoine functions on proteins, nucleic acids and cells as a stabilizer against some adverse conditions. The produciton of ectoine and its bioprotective application and mechanism were studied in the paper using phytase and lipase as model protein.
A...
【更新日期】
2011-08-23
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