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视网膜母细胞瘤血管生成拟态的初步研究     在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】 Primary Study of Vasculogenic Mimicry in Retinalblastoma
【作者】 张丽娜;
【导师】 牛膺筠;
【学位授予单位】 青岛大学;
【学科专业名称】 眼科学
【学位年度】 2010
【论文级别】 博士
【网络出版投稿人】 青岛大学
【网络出版投稿时间】 2010-10-28
【关键词】 视网膜母细胞瘤; 血管生成拟态; 缺氧; 肿瘤干细胞; 低氧诱导因子-1α;
【英文关键词】 hypoxia inducing factor-1α; retinoblastoma; VM; tumor stem cell; RNA interference; hypoxia;
【中文摘要】 目的:探讨人视网膜母细胞瘤(Retinalblastoma, RB)中血管生成拟态(Vesculogenic mimicry, VM)的存在与否;在体外通过三维培养,探讨缺氧在诱导RB细胞向内皮样细胞转化及VM形成中的作用;并利用RNA干扰(RNAi)技术构建针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的shRNA慢病毒载体,研究HIF-1α在RB细胞(Y79)形成VM中的调控作用。方法:1.收集人RB临床标本,石蜡切片,HE染色、PAS/CD34双重染色观察RB中是否存在VM,及拟态血管密度(VMD)与肿瘤分期及分化程度的关系;采用免疫组织化学方法检测肿瘤干细胞标记物ABCG2,内皮细胞标记物AC133、特异性低氧反应元件HIF-1α及其下游因子EphA2、MMP-2的表达。2.利用商品化的慢病毒载体Lentivirus构建针对HIF-1α的shRNA病毒载体,转染Y79细胞,72h后在荧光倒置显微镜下观察转染效率,新霉素抗性筛选出稳定转染的Y79细胞,Westenblot及逆转录PCR的方法分别检测HIF-1α蛋白及mRNA的表达。3.在体外对Y79细胞进行缺氧培养;倒置显微镜下观察细胞形态的改变;...
【英文摘要】 Objective To explore the existence of Vasculogenic mimicry in human Retinalblastoma; to explore the effect of hypoxia on inducing retinalblastoma cell to transform to endothelioid cell and form vasculogenic mimicry through three-dimension culture in vitro; and to build shRNA virus vector targeting at hypoxia inducing factor-la using RNAi technology; to observe the effect of hypoxia inducing retinalblastoma cell to transform to endothelioid cell. Methods 1. To collect human Retinalblastoma sample...
【更新日期】 2010-11-19

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导师:牛膺筠    导师单位:青岛大学    学位授予单位:青岛大学
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