【英文题名】
Development of an in Situ Pistil Transformation Method in Brassica Species
【作者】
郭学兰 ;
【导师】
王汉中 ;
【学位授予单位】
中国农业科学院 ;
【学科专业名称】
作物遗传育种
【学位年度】
2009
【论文级别】
博士
【网络出版投稿人】
中国农业科学院
【网络出版投稿时间】
2009-09-02
【基金】
“863”;国家自然科学;英国皇家学会;
【关键词】
甘蓝型油菜 ;
白菜 ;
芥蓝 ;
花柱 ;
胚乳 ;
【英文关键词】
Brassica napus ;
Brassica rapa ;
Kale ;
Style ;
endosperm ;
【中文摘要】
油菜在分类上属芸苔属植物,包括重要的油料作物和蔬菜。传统的芸苔属植物转基因方法是基于组织培养的根癌农杆菌介导法。这类方法存在的主要问题是转化效率低,转化和再生受基因型影响,重复性差,严重限制了芸薹属作物的基因研究和分子育种。目前甘蓝、白菜和甘蓝型油菜三物种的全基因组测序即将完成,将产生大量的功能基因。开发一种不依赖于基因型的、高效高通量的油菜转基因方法意义重大,既可以为基因研究创建突变群体,又可以为优良性状的转基因育种研究提供方法和技术平台。
本研究借鉴花粉管通道法,通过建立和优化油菜的雌蕊原位转化方法,分析甘蓝型油菜的转化时间、外源DNA溶剂和雌蕊处理方式对转化的影响,研究转基因的遗传规律,建立了一套高效可重复的甘蓝型油菜基因转化体系。继而通过比较不同白菜型油菜、甘蓝和甘蓝型油菜品种的花粉管生长规律和转化率,得到表达报告基因的除草剂抗性植株,实现了不同类型和基因型油菜的高效转化,扩展了方法的应用范围。在此基础上,本文通过分析外源GUS基因在转化种子中的表达形式,探讨了雌蕊原位转化法的生物学机理,从理论上分析了这种转基因方法的基因型非依赖性和核遗传规律。研究的结果将对油菜的转基因研究和应...
【英文摘要】
Brassica crops include many important vegetables and oil crops. Conventionally genetic transformation method for these crops is Agrobacterium-mediated transformation method based on tissue culture and explants regeneration. The main disadvantages of this method are genotype dependency, low efficiency and hard to reproduce. It is urgent to develop a high throughput and genotype-independent gene transferring method to meet the genetic improvement and gene functioning when whole genome sequences are to ...
【更新日期】
2009-09-14
【相同导师文献】
导师:王汉中 导师单位:中国农业科学院 学位授予单位:中国农业科学院
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