标记基因的克隆、化学合成和体外定向分子进化及其在果树基因工程中的应用研究-中国博士学位论文全文数据库

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标记基因的克隆、化学合成和体外定向分子进化及其在果树基因工程中的应用研究

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【英文题名】	Cloning, Chemical Synthesis and Directed Evolution of Marker Genes and Application in Fruit Genetic Engineering
【作者】	熊爱生;
【导师】	章镇; 姚泉洪;
【学位授予单位】	南京农业大学;
【学科专业名称】	果树学
【学位年度】	2007
【论文级别】	博士
【网络出版投稿人】	南京农业大学
【网络出版投稿时间】	2008-12-08
【关键词】	果树基因工程; 标记基因; 体外定向分子进化; 5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶; 基因合成; 植物转基因;
【英文关键词】	Fruit genetic engineering; Marker gene; Directed evolution in vitro; EPSPS; Chemical synthesis gene; Transgenic plant;
【中文摘要】	标记基因是一种用来筛选和鉴定转化细胞、组织和转基因植株的DNA片段,包括起富集转化细胞作用的选择基因和易于检测表达产物的报告基因。抗生素类和抗除草剂类是当前转基因作物中采用的选择标记基因。目前常用的报告基因主要包括β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、β-半乳糖苷酶基因(LacZ)、荧光素酶基因(Luc)、绿色荧光蛋白基因(gfp)和冠瘿碱合成酶基因等。植物转基因中最广泛应用的报告基因是gus。转基因作物进入商业化生产阶段,其外源基因的逃逸是不可避免的。因此使用安全的标记基因和报告基因是一个很好的选择。体外定向分子进化是发现和改造生物活性分子的重要方法,提供了一种高效获得多样性的方法。DNA改组是重要的体外分子进化技术,结合高通量筛选在农业、环境污染治理、化学工业、基因治疗、疫苗、蛋白药物等方面有着广泛的应用。近年来,许多体外分子进化的新策略和新方法层出不穷。DNA改组技术的发展和成熟是在上世纪九十年代末期。特别是进入21世纪以来,体外分子进化技术在新技术和新理论的推动下,又得到了长足的发展。推理设计是基于基因和蛋白质信息进行基因和蛋白质序列的改造,作为基因和蛋白质体外快速改造有其重要的一面。化学法合成D...
【英文摘要】	Selectable marker genes can be divided into several categories depending on whether they confer positive or negative selection and whether selection is conditional or non-conditional on the presence of external substrates.Green fluorescent protein(GFP),β-galactosidase(GAL),luciferase(LUC),β-glucuronidase(GUS),and oxalate oxidase (OxO) have been important in transgenic plant research or crop development,and have been assessed for efficiency,biosafety,scientific application and commercialization. Despit...
【更新日期】	2009-01-05

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