Bt和CpTI双价抗虫基因共转化菘蓝提高对害虫抗性的研究-中国博士学位论文全文数据库

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Bt和CpTI双价抗虫基因共转化菘蓝提高对害虫抗性的研究

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【英文题名】	Isatis Indigotica Transformed with Bivalent Expression Vector Harboring Both Bt and CpTI Genes Showed Enhanced Insect-resistance
【作者】	丁如贤;
【导师】	张汉明;
【学位授予单位】	第二军医大学;
【学科专业名称】	生药学
【学位年度】	2007
【论文级别】	博士
【网络出版投稿人】	第二军医大学
【网络出版投稿时间】	2008-01-11
【关键词】	菘蓝; 根癌农杆菌; 植物转基因; 抗虫; 苏云晶芽孢杆菌杀虫蛋白基因CryIA(c)基因; 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI);
【英文关键词】	Isatis indigotica Fort.; Agrobacterium tumefaciens; Plant treansformation; Insect resistance; Bacillus thuringiensis (Bt) crystal protein CryIA(c) gene; CpTI cowpea trysin inhibitor gene;
【中文摘要】	本研究构建分别带有CryIA(c)基因和CpTI基因两表达盒的植物表达载体pGBI121S4ABC。采用农杆菌介导转化菘蓝。双基因转化的阳性率二倍体子叶是14.75%,四倍体子叶是16.67%。Southern杂交分析,结果转基因菘蓝出现预期的杂交带,未转化植株没有杂交信号,并都呈单一拷贝。ELISA检测基因的蛋白质表达量,发现CryIA(c)基因蛋白表达量可高达436.33 ng/g, CpTI可达158.31 ng/g。用转基因菘蓝叶片饲喂目标害虫小菜蛾,有两株能完全杀死目标害虫,有4株能部分杀死目标害虫,40%以上的转基因植株具有明显抑制害虫生长的作用。转抗虫基因菘蓝前后有效部位成分含量没有明显变化。
【英文摘要】	The plant binary expression vector pGBI121S4ABC carrying two insect resistance genes CryIA(c)-CpTI was constructed. The genes were transformed into the explants through Agrobacterium-mediated transformation. The rates of PCR positive for cotyledons of diploid and tetraploid Isatis indigotica were 14.75% and 16.67 % respectively.The resoults of Southern blot were Positive transgenic lines all showed single hybridization bands as expected (all single copy), while wild type showed no hybridization ba...
【更新日期】	2008-02-01

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