嗅鞘细胞对体外培养螺旋神经节细胞的作用及相关细胞因子和受体-中国博士学位论文全文数据库

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嗅鞘细胞对体外培养螺旋神经节细胞的作用及相关细胞因子和受体

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【英文题名】	The Effects of Rat Olfactory Ensheathing Cells on Spiral Ganglion Cells and the Relative Cytokines and Receptors
【作者】	叶菁;
【导师】	张重华; 余洪猛; 李华伟;
【学位授予单位】	复旦大学;
【学科专业名称】	耳鼻咽喉科学
【学位年度】	2007
【论文级别】	博士
【网络出版投稿人】	复旦大学
【网络出版投稿时间】	2007-10-15
【关键词】	嗅鞘细胞; 纯化培养; 免疫荧光化学染色; 螺旋神经节细胞; 体外培养; B27添加剂; 突起长度; 细胞存活; 生长; 凋亡; 增殖; 细胞因子; 细胞因子受体; RT-PCR;
【英文关键词】	olfactory ensheathing cells; purified culture; immunofluorescence staining; spiral ganglion cells; culture in vitro; B27supplement; the length of nervous process; cellular survival; OECs CM; SGCs; culture; growth; apoptosis; proliferation; OECs; cytokine; cytokine receptor; RT-PCR;
【中文摘要】	第一部分嗅鞘细胞的体外培养、纯化和鉴定目的进行嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells，OECs)的培养和纯化，观察其免疫荧光化学染色的表现，并计算OECs的培养纯度，为下一步试验打下基础。方法分离新生2天SD大鼠的嗅球，制成单细胞悬液，在含10％FBS的DMEM／F12培养液(FBS组)、含1％N2的DMEM／F12培养液(N2组)、含1％B27的DMEM／F12培养液(B27组)以及含1％N2和1％B27的DMEM／F12培养液(N2+B27组)中进行培养，观察OECs的生长状态。采用多次长时差速贴壁法和低浓度胰酶快速消化法对FBS组的OECs进行纯化并计算细胞纯度，用p75NTR和GFAP进行免疫细胞荧光化学染色，激光共聚焦显微镜观察其染色特点。结果OECs在N2组、B27组和N2+B27组的三种无血清培养条件下难以存活，在FBS组的有血清培养条件下生长良好，主要污染细胞是成纤维细胞。采用多次长时差速贴壁法和低浓度胰酶快速消化法可获得较高的细胞纯度，培养2周时细胞纯度为89.4±7.3％，OECs联合表达p7...
【英文摘要】	PartⅠCultivation, purification and identification ofolfactory ensheathing cells Objectives: To develop a method of cultivation and purification of olfactory ensheathing cells (OECs), calculate the purity of OECs and observe the immunofluorescence properties under the laser confocal microscope. Methods: The olfactory bulbs from neonatal 2d SD rats were dissected. The tissue was dissociated by digestion and triturating and made into single cell suspension, which was cultured in DMEM/...
【更新日期】	2007-11-15

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