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陆地棉农杆菌介导遗传转化体系的优化与利用     在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】 Optimization and Utilization of Agrobacterium-Mediated Transformation System of Gossypium Hirsutum L.
【作者】 吴慎杰;
【导师】 张天真;
【学位授予单位】 南京农业大学;
【学科专业名称】 作物遗传育种
【学位年度】 2006
【论文级别】 博士
【网络出版投稿人】 南京农业大学
【网络出版投稿时间】 2007-11-05
【关键词】 棉花; 胚性愈伤; 转化; 再生潜力; 再生植株; 代谢胁迫; 高频再生纯系;
【英文关键词】 Cotton; embryogenic calluses; Transformation; Regeneration potential; Metabolic stress; High-frequency somatic embryogenesis pure lines;
【中文摘要】 传统的棉花农杆菌介导转化使用子叶和下胚轴为外植体,以Coker 312作为模式品种。由于其转化和再生经历体细胞胚胎发生,所以该方法被认为是棉花转化的首选方法,并为棉花转基因做出了巨大的贡献。但这一体系受到了基因型的严重限制,即便是转化成功了的品种仍然受转化周期长、成胚率低、易出现畸形胚、体细胞胚植株再生比例低和缺乏茎的伸长等因素的限制。本研究对传统的转化体系进行了优化,以长江流域主栽品种泗棉3号为受体建立了下胚轴为外植体的高效的转化体系,并首次将插皮接用于棉花再生植株的嫁接;为了进一步提高转化的效率,建立和优化了以泗棉3号胚性愈伤为受体的转化体系,利用此体系已将多个基因成功导入泗棉3号;利用组织培养的方法对WO品系和泗棉3号的再生潜力进行研究。研究的结果如下: 1.分析了影响传统转化体系转化效率的因素;通过改变诱导愈伤时的氮素形态、及时挑选胚性愈伤、利用代谢胁迫促进再生出苗等措施对转化体系进行了优化。对各种胁迫的直接和间接效应以及不同氮素形态的供应进行了理论分析,结果显示氮素形态和透气胁迫对体系的优化至关重要。首次将插皮接技术用于棉花再生植株的繁殖,该技术要求简单,操作方便,...
【英文摘要】 Conventionally, Agrobacterium-mediated transformation used hypocotyls or cotyledonas explants and Coker 312 as its model cultivar, which was via somatic embryogenesis andwas the preferred method for transgenic cotton. The transformation protocol was severelyrestricted by genotype-dependent response. Although some genotypes have beentransformed successfully, low regeneration efficiency of via somatic embryogenesis, aprolonged culture period, high frequency of abnormal embryo development, lowconvers...
【更新日期】 2007-12-05

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导师:张天真    导师单位:南京农业大学    学位授予单位:南京农业大学
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