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1. 抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性研究 2. 单克隆抗体（mAb5D3）相应抗原的纯化及其N-端氨基酸序列分析     在线阅读　整本下载　分章下载　分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】 1. The Establishment of Two Anti-human-osteosarcoma Antibody Producing Hybridoma Cell Lines and the Characterization of the Monoclonal Antibodies 2. Purification and Amino Acid Sequence Analysis of mAb5D3's Corresponding Antigen
【作者】 何大为;
【导师】 范清宇; 张惠中;
【学位授予单位】 第四军医大学;
【学科专业名称】 外科学
【学位年度】 2000
【论文级别】 博士
【网络出版投稿人】 第四军医大学
【网络出版投稿时间】 2006-12-25
【关键词】 成骨肉瘤; 单克隆抗体; 杂交瘤; 酶联免疫吸附试验; 免疫组织化学染色; 免疫亲合层析; 成骨肉瘤相关抗原; Western-Blot; 蛋白质氨基酸序列分析;
【英文关键词】 osteosarcoma; hybridoma; monoclonal antibody; immunochemistry; Western-Blot; immunoaffinity chromatography; Osteosarcoma associated antigen; amino acid sequencing;
【中文摘要】 目的：建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及单克隆抗体特性进行研究。方法：利用我室自建的成骨肉瘤细胞系(OS-9607)免疫BALB／C小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2／0融合，经筛选和克隆化，制备杂交瘤细胞系，用免疫组化和Western-Blot方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性。结果：共筛选出阳性克隆25孔，阳性率为4.1％，选择克隆生长好、特异性强的3孔细胞进行克隆化，培养出2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中6E7和5D3株杂交瘤细胞经过100d连续培养，单克隆抗体mAb6E7和mAb5D3分泌稳定、特异性强、效价高，经鉴定mAb6E7为IgG_1亚型，培养上清效价为1：100，腹水效价为1：105~5，mAb5D3为IgG2a亚型，培养上清效价为1：100，腹水效价为1：10~6。免疫组化检测结果发现，mAb6E7和mAb5D3相应抗原在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系呈高度表达(80％)，mAb6E7和其它恶性骨肿瘤、呼吸、消化系统肿瘤有交叉反应，mAb6E7和mAb5D3与正常组织罕有阳性反应；中度以上染色者占阳性总数的80％以上，mAb6E7主要分布于细胞膜和细胞浆内，mA...
【英文摘要】 AIM: To establish anti-osteosarcoma antibody producing hybridoma cell lines and study the characterization of the monoclonal antibodies. METHODS: The BALB/C mice was immunized with human osteosarcoma cells OS-9607 and the immunized spleen cells were fused with SP2/0 cells to raise hybridomas after three times inoculation. The positive clones of hybridoma were screened with ELISA and immunochemistry methods using OS-9607 and normal Hepatocelluar cells seeded 96-well plate and antibodies from the positive clo...
【更新日期】 2007-02-02

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