【英文题名】
Study on the Enzyme-like Catalytic Mechanism of Hemoglobin and Its Interaction with Active Nitrogen and Oxygen Species
【作者】
李得加 ;
【导师】
邹国林 ;
【学位授予单位】
武汉大学 ;
【学科专业名称】
生物化学与分子生物学
【学位年度】
2005
【论文级别】
博士
【网络出版投稿人】
武汉大学
【网络出版投稿时间】
2006-03-27
【关键词】
血红蛋白 ;
过氧亚硝基阴离子 ;
中间体 ;
类酶催化 ;
反应机理 ;
【英文关键词】
Hemoglobin ;
peroxynitrite ;
intermediate ;
enzyme-like catalyze ;
reaction mechanism ;
【中文摘要】
血红蛋白(Hb)是血红细胞中的一种主要的血红素蛋白,在体内担负着O_2和CO_2的转运等功能。除此之外,Hb还具有多种酶活性。本文研究了Hb催化H_2O_2氧化邻苯二胺(OPDA)反应中间体的特性。用动态快速停留光谱仪跟踪反应,可以捕捉到中间体的吸收峰。在水-正丁醇二相体系中提纯得到稳定的中间体,并证实此中间体在710nm处的吸收峰是与OPDA相关的中间体的吸收峰,在-10℃下中间体的半衰期为一个星期。用紫外-可见光谱、红外光谱和质谱对中间体和产物进行了表征。结果表明产物是2,3-二氨基吩嗪,中间体是比产物多两个氢原子的吩嗪类化合物,分析了中间体的结构并对其进行了命名。结合辣根过氧化物酶(HRP)的催化反应机理和我们的实验结果,提出了一种可信的Hb催化H_2O_2氧化OPDA的反应机理。
研究了Hb活性中心金属离子对其酶活性的影响。将Mn-原卟啉Ⅸ与脱辅基Hb重组得到Mn取代Fe的重组Hb,用紫外-可见光谱法和SDS-PAGE电泳法对其进行了鉴定。检测了Mn取代Hb的过氧化物酶活性和过氧化氢酶活性。结果表明,Mn取代Hb的过氧化物酶活性是Hb的70%,过氧化氢酶活性是Hb的1.9倍...
【英文摘要】
Hemoglobin (Hb) is the major hemeprotein of red blood cells (RBCs) and is responsible the transport of oxygen to the tissues. Hb has oxidant activities, and it has been proved that Hb can be used as mimetic peroxidase. While, it is not clear about the reaction mechanism, especially the relationship of reaction intermediate, structure and antioxidant activities.In this work, we set out to confirm whether the product of H_2O_2 mediated oxidation of OPDA catalyzed by metHb is DAPN, the same as the product of O...
【更新日期】
2006-05-15
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