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表皮生长因子受体介导的靶向性基因治疗导入系统     在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】 Epidermal Growth Factor Receptor-targeted Gene Delivery System
【作者】 李宗海;
【导师】 顾健人; 徐宇虹; 李锦军;
【学位授予单位】 复旦大学;
【学科专业名称】 病原生物学
【学位年度】 2005
【论文级别】 博士
【网络出版投稿人】 复旦大学
【网络出版投稿时间】 2005-09-19
【关键词】 GE11; 靶向性噬菌粒颗粒; 蛋白III; 辅助噬菌体; 制备方法; EGFR受体; 基因转染; 羟基喜树碱; EGFR; 噬菌体展示; 配体多肽; 内吞; 噬菌体回收实验; 碘标记; 竞争结合实验; 亲和常数; 体内分布; 促有丝分裂活性; GE11非病毒基因导入系统; 凝胶阻滞实验; DNA酶保护试验; 粒径测定; 靶向基因导入; 聚乙烯亚胺;
【英文关键词】 peptide-targeted phagemid particles; preparation; helper phage; EGFR; Gene transduction; Hydroxycamptothecin; GE11 peptide; Protein III; EGF; Phage display; Peptide ligand; Phage recovery assay; Internalization; Iodide labeling; Dissociation constant; Scatchard analysis; In vivo distribution; MTT assay; Biological activity; FITC labeling; GE11; PEI; nonviral gene delivery vector; luciferase gene;
【中文摘要】 肿瘤基因治疗有望成为除手术、放疗和化疗等方法外的又一新的抗癌策略。尤其在抗肿瘤转移和复发方面将起重要作用。目前还缺乏将基因导入肿瘤细胞的高效靶向性载体系统,这是肿瘤基因治疗至今尚未成为临床常规治疗措施的关键因素之一。表皮生长因子受体(EGFR)由于在很多肿瘤有高表达,因此是一个很好的靶点。本研究旨在建立一种靶向EGFR受体的基因导入系统并检验其有效性,为肿瘤的靶向性基因治疗提供可靠的理论依据与实践指导。 第一部分 利用噬菌体多肽展示文库筛选表皮生长因子受体的配体多肽 【目的】寻求可以与表皮生长因子受体(EGFR)受体特异性结合的配体多肽。【方法】以EGFR蛋白为靶,利用噬菌体展示随机12肽库进行筛选;或者构建稳定高表达EGFR突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)胞外区的U87细胞系,以该细胞系为筛选靶,利用环7肽库和12肽库进行筛选。经过多轮筛选后,随机挑选克隆进行测序。把富集的克隆通过免疫组化及噬菌体回收试验鉴定获得可以与靶蛋白结合的克隆;进一步采用内吞实验研究噬菌体阳性克隆的特征。【结果】通过EGFR蛋白为靶筛选,经过三轮筛选获得展示GE11(YHWYGYTPQNV...
【英文摘要】 Besides surgery, radiotherapy and chemotherapy, gene therapy is potential to be another way for cancer therapy. It may play an important role in preventing cancer from recurrence and metastasis. However, the main issue remains to be resolved is lack of an efficient targeting gene transfer system. Therefore, it is very urgent to develop an efficient targeting gene delivery vector. Since overexpression of EGFR has been frequently found in a wide spectrum of human tumors of epithelial origin, we have attempted...
【更新日期】 2005-11-15

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