本研究表明,采用CTAB缓冲液 [2 % CTAB (w/v), 1.4 M NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8.0) 和 20 mM EDTA] 提取新鲜的海带配子体的DNA,可以获得理想的结果。提取的DNA长度约为23kb,A260/A280的比值平均为1.6。用该法提取的DNA可用于限制性酶酶切,ITS特异性扩增及RAPD扩增。
运用RAPD分析技术,对33个海带配子体进行了种质鉴定,筛选出的18条随机引物共扩增出233个位点,从中选择了27个多态性位点作为构建海带种质的指纹图谱的候选标记,利用计算机程序分析,从27个位点中,又优选出了7个RAPD标记,构建了33个配子体的指纹图谱。在此基础上,将3个海带配子体特异的RAPD片段成功地转化为SCAR标记。对所获得的一个SCAR标记进行了Southern杂交分析。本研究表明,利用RAPD分析技术对海带进行种质鉴定,并且利用SCAR标记对海带进行分子辅助选育是可行的。
应用ISSR标记方法,对10对海带配子体的遗传多样性进行了研究。通过筛选,获得10条ISSR引物,通过扩增得到58个位点,其中34个位点...
【英文摘要】
CTAB method has been selected for DNA extraction from Laminaria gametophytes in our study, and it is showed that fresh and partial dried gametophytes are lysed in CTAB buffer with grind [2 % cetyltrimethyl ammonium bromide (w/v), 1.4 M NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8.0) and 20 mM ethylenediaminetetraacetate (EDTA)] could yield ideal result. About 10μg DNA were collected from 0.3 g partial dried gametophytes. The average size of the extracted genomic DNA detected is 23 kb and its purity is 1.6 (A260/A280). Our p...
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