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猪δ冠状病毒的分离、鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立  
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【英文题名】 Isolation,Identification and Establishment of Fluorescent Quantitative PCR Detection Method for Porcine Deltacoronavirus
【作者】 肖帅;
【导师】 魏彦明; 王永录;
【学位授予单位】 甘肃农业大学;
【学科专业名称】 生物化学与分子生物学
【学位年度】 2018
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 甘肃农业大学
【网络出版投稿时间】 2018-07-24
【关键词】 猪δ冠状病毒; 腹泻; 分离鉴定; 实时荧光定量PCR; 标准曲线;
【英文关键词】 porcine deltacoronavirus; diarrhea; isolation and identification; real-time fluorescence quantitative PCR; standard curve;
【中文摘要】 猪δ冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是一种能够引起猪严重水样腹泻、呕吐及脱水的猪肠道冠状病毒。PDCoV基因组为单股正链RNA,与PEDV基因组结构相似,基因组大小为25.4 kb,包含5′和3′非翻译区及7个开放性阅读框。随着PDCoV在全球范围内的不断流行和演化,给猪腹泻病的防控带来了新的挑战。因此,广泛收集、鉴定PDCoV流行毒株,建立相应的快速诊断方法对有效地预防和控制PDCoV具有重要意义。本研究收集了国内多个省份的猪腹泻样品,并对PDCoV阳性的腹泻样品进行了病毒分离与鉴定,为全面了解国内PDCoV流行情况及研制新的、有效防控产品积累了材料和基础。此外,本研究还建立了一种以TaqMan实时荧光定量PCR为基础的PDCoV快速检测方法,为PDCoV的临床快速诊断提供有效而准确的方法。(1)PDCoV病毒的分离鉴定:在2016、2017年间从河南、新疆、黑龙江等国内9省区采集了608份腹泻粪便样品。利用RT-PCR对样品进行了检测并测序,并通过将8份PDCoV阳性样品在LLC-PK1细胞上的体外适应性传代培养,成功分离获得了一株细胞适应毒株CH/HNZZ27/2...
【英文摘要】 Porcine Deltacoronavirus(PDCoV)is a pig intestine coronavirus that causes severe watery diarrhea,vomiting,and dehydration in pigs.The PDCoV genome is a single-stranded positive-stranded RNA with a similar structure to the PEDV genome.The genome size is 25.4 kb and contains 5'and 3'untranslated regions and seven open reading frames.With the continuous epidemic and evolution of PDCoV in the world,it has brought new challenges to the prevention and control of diarrheal diseases in pigs.Therefore,extensive coll...
【更新日期】 2018-08-09

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