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乳腺癌及大肠癌循环肿瘤细胞捕获及鉴定方法的建立  
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【英文题名】 Establishment of Capture and Identification Method for Breast and Colorectal Cancer Circulation Tumor Cell
【作者】 戚丽娜;
【导师】 郑树;
【学位授予单位】 浙江大学;
【学科专业名称】 临床医学(专业学位)
【学位年度】 2017
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 浙江大学
【网络出版投稿时间】 2017-07-24
【关键词】 乳腺癌; 大肠癌; 循环肿瘤细胞; 密度梯度离心; 免疫荧光; 免疫组织化学;
【英文关键词】 Breast cancer; Colorectal cancer; Circulation tumor cell; Density gradient centrifugation; Immunofluorescence; Immunohistochemistry;
【中文摘要】 目的:利用密度梯度离心法及cytospin甩片机富集肿瘤细胞,后利用吉姆萨染色鉴定细胞形态,结合免疫荧光和免疫组化对细胞表面标志物的鉴定进一步确认是否为肿瘤细胞。从而建立较为简便的CTC捕获及鉴定方法。方法:1.肿瘤细胞的富集:在外周血中加入淋巴细胞分离液,利用密度梯度离心法进行肿瘤细胞的富集,将获得的细胞经cytospin甩片。2.肿瘤细胞的鉴定:利用吉姆萨染色确认肿瘤细胞形态,联合免疫荧光及免疫组织化学的方法利用细胞表面标志物CK及EpCAM对肿瘤细胞进行鉴定。3.对该方法的肿瘤细胞回收率进行实验,在lm丨健康人外周血中分别加入10,50,100个左右MCF-7或SW620肿瘤细胞,利用Giemsa染色方法对肿瘤细胞进行计数计算回收率。通过设立阳性对照组,阴性对照组及实验组来建立实验方法。阳性对照组为lml健康人外周血加入相应数量的肿瘤细胞,阴性对照组为1ml健康人外周血,实验组为1ml乳腺癌或结直肠癌病人外周血。从而建立具有一定的敏感性及特异性且较为简便的CTC捕获及鉴定方法。结果:阳性对照中,10/10例在Giemsa染色中可见形态较大细胞,在免疫荧光及免疫组织化学方法鉴定肿瘤细胞中可见阳性细胞。在阴...
【英文摘要】 ObjectiveThis research used the method of density gradient centrifugation and cytospin to enrich tumor cells in peripheral blood.Then,Giemsa staining was utilized to observe cell morphology combined with immunohistochemistry and immunofluorescence to identify whether the captured cells were tumor cells according to the specific molecular on cell surface.Hence,a more simple and convenient method of capture and detecting circulation tumor cells was likely to be established.Methods:1.Enrichment:The method of d...
【更新日期】 2018-01-04

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导师:郑树    导师单位:浙江大学    学位授予单位:浙江大学
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