【英文题名】
Cloning and Heterologous Expression of Lumbrokinase Gene
【作者】
李龙飞 ;
【导师】
汤斌 ;
【学位授予单位】
安徽工程大学 ;
【学科专业名称】
微生物学
【学位年度】
2017
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
安徽工程大学
【网络出版投稿时间】
2017-07-13
【关键词】
赤子爱胜蚓 ;
蚓激酶 ;
大肠杆菌 ;
毕赤酵母 ;
酶学性质 ;
【英文关键词】
Eisenia foetida ;
Lumbrokinase ;
Escherichia coli ;
Pichia pastoris ;
Enzymatic properties ;
【中文摘要】
蚓激酶(Lumbrukinase,LK)是从蚯蚓粗提物中分离得到的一类具有纤溶活性的蛋白质。其不但能激活纤维蛋白溶酶原转变为纤溶酶,刺激血管内皮细胞释放组织纤溶酶原激活物(t-PA),间接促进纤维蛋白的溶解,且能够直接水解纤维蛋白。此外,蚓激酶拥有良好的溶栓效果,可以改善微循环,增加血管弹性,降低血液粘度,抑制血栓再次形成,因而广泛应用于临床,且越来越多地用在心脑血管、内分泌,呼吸系统等疾病的预防和治疗中。论文主要研究了野生型赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)蚓激酶EFLK在大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母中的表达,对重组毕赤酵母的发酵条件进行了优化,并对蚓激酶进行分离纯化及酶学特性的初步探究。主要工作如下:(1)从野生蚯蚓中提取基因组,利用分子生物学手段进行物种鉴定及系统发育树的构建,确定该野生蚯蚓属于赤子爱胜蚓。(2)提取赤子爱胜蚯蚓总RNA,利用反转录试剂盒获得单链cDNA作为为模板,克隆得到蚓激酶基因Eflk(GenBank登录号:KY452025)。利用生物信息学软件分析蚓激酶基因Eflk全长为738 bp,编码245个氨基酸,其中含有一个由7个氨基酸组成的信号肽。蚓激酶EFLK与粉正蚓的蚓激酶F...
【英文摘要】
Lumbrukinase(LK)is a kind of protein with fibrinolytic activity isolated from earthworm crude extract.It not only activates plasminogen into plasmin,stimulates the release of tissue plasminogen activator(t-PA),then indirectly promotes the dissolution of fibrin,and can directly hydrolyze fibrin.In addition,lumbrokinase has a good thrombolytic effect,which can improve microcirculation,increase vascular elasticity,reduce blood viscosity,inhibit the formation of thrombosis,thus is widely used in clinical contai...
【更新日期】
2018-01-01
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