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大丽轮枝菌VdLac基因的克隆与功能分析  
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【英文题名】 Cloning and Functional Analysis of VdLac in Verticillium Dahliae
【作者】 曹亚松;
【导师】 杨家荣; 胡小平;
【学位授予单位】 西北农林科技大学;
【学科专业名称】 植物病理学
【学位年度】 2017
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 西北农林科技大学
【网络出版投稿时间】 2017-07-17
【关键词】 大丽轮枝菌; 漆酶; 基因敲除; 黑色素; 致病力;
【英文关键词】 Verticillium dahliae; laccase; gene knockout; melanin; pathogenicity;
【中文摘要】 大丽轮枝菌是一种典型的土传病原真菌,寄主范围广泛。微菌核是大丽轮枝菌的主要休眠结构,抗逆性强,可在没有寄主的情况下存活14年,这与其体内含有丰富的黑色素密切相关。黑色素是一种由酚类或吲哚类化合物组成的带有负电荷的疏水性高分子聚合物,能够保护真菌免受环境和寄主的影响。漆酶是黑色素合成通路中的关键酶,在真菌生长发育的过程中发挥着重要的作用。本文通过农杆菌介导的遗传转化和PEG介导的原生质体转化方法对大丽轮枝菌中的漆酶基因VdLac进行了敲除和互补,研究漆酶基因在大丽轮枝菌中的主要功能。结果如下:1.根据NCBI上已公布的VdLs.17的基因组序列,克隆得到漆酶基因VdLac序列,VdLac基因全长1978 bp,c DNA序列全长1713 bp,编码570个氨基酸。2.利用农杆菌介导的遗传转化方法(ATMT)对VdLac进行敲除,并通过潮霉素抗性筛选和PCR检测确定阳性敲除突变体,获得了4个敲除突变体。3.通过PEG介导的原生质体转化方法将互补质粒随机插入到敲除突变体中,经G418抗性筛选和PCR检测确定了1株阳性互补突变体。4.通过对敲除和互补突变体进行一系列的生物学功能测定,分析漆酶基因的功能。结果表明,Vd...
【英文摘要】 Verticillium dahliae Kleb.is a typical soil-borne pathogenic fungus,and can cause Verticillium wilt on many plant species.Microsclerotia of V.dahliae are main dormant structure that enable V.dahliae to survive up to 14 years in the absence of a host.It also have strong resistance.Melanins are pigment formed by phenolic or indole compounds,also are hydrophobic biopolymers with negatively charge.Melain has a protective role in the host and in the environment.Laccases are the key enzymes of fungal melanin synt...
【更新日期】 2018-01-05

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