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蛇类肝脏中胆酸盐输出泵BSEP的初步鉴定研究  
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【英文题名】 Preliminary Identification of Bile Salt Export Pump(BSEP) in Snake Liver
【作者】 高飞;
【导师】 陈家春;
【学位授予单位】 华中科技大学;
【学科专业名称】 生药学
【学位年度】 2016
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 华中科技大学
【网络出版投稿时间】 2016-10-26
【关键词】 胆酸盐输出泵; 同源性; DNA末端快速扩增; 蛋白质组学;
【英文关键词】 BSEP; homology; RACE; proteomics;
【中文摘要】 目的:蛇胆是常用中药。本文对蛇肝脏中主要负责胆汁酸分泌的转运蛋白-胆酸盐输出泵(BSEP)展开相关文献和实验研究,从基因水平和蛋白水平分别对BSEP进行初步鉴定,为蛇胆汁代谢调控的进一步研究奠定基础。方法:在基因水平,以经计算机生物信息学分析推测的眼镜王蛇、剑纹带蛇、缅甸王蛇BSEP的编码基因ABCB11的部分序列信息为基准,设计特异性识别ABCB11的引物,对聚合酶链式反应产物进行同源性对比分析,鉴定蛇肝脏中BSEP;以上述测序序列为基础,采用3′RACE及5′RACE技术(DNA末端快速扩增)获得大王蛇ABCB11基因全序列;在蛋白质水平,采用纳升级毛细管反相液相色谱串联质谱(RPLC-MS/MS)将蛇肝脏总蛋白分成15个组分的混合肽段,洗脱后直接进入triple-TOF对离子信息进行分析,搜索眼镜王蛇的蛋白组数据,进行蛋白质组学分析。结果:通过聚合酶链式反应并结合同源性分析,得到了ABCB11的4段序列信息。采用3′RACE技术获得大王蛇肝脏中ABCB11的3′端未知序列,并与上述四段序列拼接到一起(共2666bp),拼接序列与三种蛇推测的ABCB11同源性极高;而5′RACE未达到理想结果,仍需进一步...
【英文摘要】 Objective: Snake bile is a normal Traditional Chinese Medicine. This research focuses on the principal transporter in charge of bile acid secretion- bile acid export pump(BSEP) in snake liver to identify BSEP in genetic and protein level. That could built up foundation for further study on bile metabolism and regulation.Methods: In genetic level, specific primers were designed based on bioinformatic prediction on genes coding BSEP in three kinds of snakes(Ophiophagus Hannah, Thamnophis sirtalis and Python b...
【更新日期】 2017-11-02

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