基于微流控系统的高通量蛋白质结晶筛选新方法研究-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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基于微流控系统的高通量蛋白质结晶筛选新方法研究

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【英文题名】	Study of New Techniques for High-throughput Protein Crystallization Screening Based on Microfluidic Systems
【作者】	梁翼然;
【导师】	方群; 祝莹;
【学位授予单位】	浙江大学;
【学科专业名称】	化学
【学位年度】	2016
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	浙江大学
【网络出版投稿时间】	2017-04-05
【关键词】	微流控学; 蛋白质结晶; 3D打印技术; 浓度梯度; 高通量筛选;
【英文关键词】	microfluidics; protein crystallization; 3D printing; concentration gradient; high-throuput screening;
【中文摘要】	迄今,X射线晶体学是解析蛋白质结构的主要研究手段,而获得高质量的蛋白质晶体仍需要大量实验的筛选。微流控技术因具有高通量、低耗费、集成化和促进结晶等优势,而为蛋白质结晶筛选提供了可靠的方法。第一章阐述了蛋白质结晶筛选的主要方法、商品化的蛋白质结晶平台及发展趋势；探讨了目前基于微流控技术的蛋白质结晶筛选技术和所采用的方法；介绍了近几年3D打印技术在微流控系统的应用。第二章中,我们发展了一种基于3D打印微孔阵列芯片和液滴技术的纳升级蒸气扩散蛋白质结晶和筛选方法。我们利用3D打印技术加工了具有不同体积微孔的微孔阵列芯片；发展了针对3D打印芯片内部微孔隙的后处理技术和具有多层结构的3D打印芯片密封体系,从而获得完全密封的结晶微腔室；最终结合本实验室的液滴操纵技术,实现了纳升级蒸气扩散蛋白质结晶和筛选。其蛋白消耗量比常规体系下蒸气扩散蛋白质结晶每次试验消耗的蛋白质溶液降低了10-100倍。第三章中,我们发展了一种蛋白质结晶筛选的新方法——高分辨微批量法。该方法通过在毛细管内形成可控的蛋白质浓度梯度溶液,结合本实验室的液滴阵列机器人技术,在玻璃芯片上形成大规模的蛋白质浓度梯度液滴,从而进行高分辨微批量法蛋白质结晶筛选。我们...
【英文摘要】	Currently, X-ray crystallography is the most important method for structure identification of proteins, which requires diffraction-quality crystals. However, obtaining protein crystals mainly relies on large-scale trial screening of a tremendous chemical space with a high consumption of protein. Microfluidic technology offers reliable methods for protein crystallization screening, taking advantages of high-throughput, low consumption, integration and promotion of crystallization.In the 1st chapter, the meth...
【更新日期】	2017-04-10

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