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SMMC-7721与L02细胞系N-和O-糖组定性定量比较分析  
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【英文题名】 Quanlitation and Quantitation Comparative Analysis of N- and O-glycomics from SMMC-7721 and L02 Cells
【作者】 顾笑;
【导师】 黄琳娟;
【学位授予单位】 西北大学;
【学科专业名称】 细胞生物学
【学位年度】 2016
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 西北大学
【网络出版投稿时间】 2017-03-28
【基金】 国家自然科学;
【关键词】 SMMC-7721; L02; N-糖组; O-糖组; 糖链标志物; ESI-MS; HILIC-MS;
【英文关键词】 SMMC-7721; L02; N-glycomics; O-glycomics; glycan biomarker; ESI-MS; HILIC-MS;
【中文摘要】 糖基化修饰作为蛋白质主要的翻译后修饰类型之一,在许多机体的生命过程中具有十分重要的作用。其异常变化与多种疾病如肝癌的发生与发展往往是密不可分的。随着糖组学质谱分析技术的不断发展,筛选肿瘤相关糖链标志物已成为当今糖组学研究的一个热点。肝细胞癌SMMC-7721自1980年由第二军医大学从50岁男性原发性肝癌患者体内取出建系以来,广泛的应用于抗癌药物活性研究及分泌蛋白质组研究等,但较少涉及其糖组学的相关研究。本研究以人原发性肝癌细胞系SMMC-7721和正常肝细胞系L02为实验对象,采用RIPA裂解液和物理破碎相结合的方法,从这两种细胞系中分别提取总蛋白,首先用PNGaseF酶使蛋白上的N-糖链释放下来,以超滤浓缩离心法分离出N-糖链和带有O-糖链的蛋白质；接着以“一釜法”来释放其O-糖链；最后对N-和O-糖链分别进行衍生及纯化,采用电喷雾电离质谱、二级质谱和亲水作用色谱-质谱在线联用技术对分离纯化后的2种细胞系的N-和O-糖链进行结构鉴定及定量比较。本研究旨在比较原发性肝癌细胞系SMMC-7721与正常肝细胞L02的N-糖组和O-糖组在结构与数量方面的异同,分析肝癌细胞的蛋白质糖基化特征,为肝癌糖链标志物的研究...
【英文摘要】 Glycosylation, one of the most common post-translational protein modifications, acts an important role in eukaryotic systems. With the continuous development of biological mass spectrometry technology, profiling the specific glycan as the tumor biomarkers has attracted the interest in glycobiology research.In this study, we chose SMMC-7721, a human hepatocellular carcinoma cell line, and L02 from human normal liver tissue as our objects materials. The total proteins of SMMC-7721 and L02 were extracted throu...
【更新日期】 2017-04-07

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